课件18张PPT。专题28 浅尝现代生物技术 生物 (浙江选考专用)考点 植物组织培养1.(2015浙江10月选考,32,14分)科研人员拟将已知的花色基因(目的基因)转入矮牵牛的核基因 组中,培育新花色的矮牵牛。请回答: (1)为了获得大量的目的基因,将其与含有抗生素抗性基因的质粒DNA形成重组DNA,再与经 ????(A.氯化钙 B.氯化钠 C.蔗糖 D.葡萄糖)处理的大肠杆菌液混合,使重组DNA进入 大肠杆菌。用 ????的玻璃刮刀将稀释后的大肠杆菌液 ????接种到含有抗生素的固体培 养基上,经培养形成 ????,再进行鉴定和扩大培养。 (2)从扩大培养的大肠杆菌中提取含有目的基因的DNA,用 ????分别切割含 目的基因的DNA和农杆菌的Ti质粒,然后用DNA连接酶连接,形成重组DNA并导入农杆菌。 (3)取田间矮牵牛的幼嫩叶片,经自来水冲洗,先用70% ????浸泡,再用5%次氯酸钠浸泡,最后 用 ????清洗,作为转基因的受体材料。 (4)将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片,在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后,取出并转移至加 有适当配比生长调节剂的MS培养基(含蔗糖、琼脂和抗生素,下同)上,使叶小片先脱分化形成 ????,再将其转移至另一培养基诱导形成芽,芽切割后转移至 ????(A.LB培养基 B. MS培养基+适宜浓度NAA C.MS培养基+适宜浓度BA D.NAA/BA小于1的MS培养基)上生 根,形成完整植株。 (5)取出试管苗,在适宜的光照、温度和80%以上的 ????等条件下进行炼苗。提取叶片组织 的DNA,采用PCR技术 ????目的基因,鉴定目的基因是否成功导入。 (6)为判断本研究是否达到预期目的,可比较转基因植株和非转基因植株的 ????性状。答案 (1)A 灭菌 涂布 菌落 (2)限制性核酸内切酶 (3)酒精 无菌水 (4)愈伤组织???? B (5)湿度 扩增 (6)花色解析 本题考查基因工程的原理及操作过程,同时也考查了基因工程在植物组织培养中的应 用。(1)将重组质粒导入大肠杆菌细胞,需先用氯化钙处理大肠杆菌,增加其细胞壁的通透性, 便于重组质粒进入大肠杆菌。常用的微生物分离的方法有划线分离法和涂布分离法,其中涂 布分离法需要用经过灭菌的玻璃刮刀将菌液涂布接种到相应的培养基上,经过培养,培养基上 会形成菌落。(2)切割含目的基因的DNA和农杆菌的Ti质粒,需要用到限制性核酸内切酶。(3) 矮牵牛的幼嫩叶片经自来水冲洗后,先用70%的酒精浸泡,再用5%的次氯酸钠浸泡,最后用无 菌水清洗,作为转基因的受体材料。(4)导入目的基因的离体组织在有适当配比生长调节剂的 MS培养基中脱分化形成愈伤组织,然后再分化形成植株,其中诱导生根时需要有适宜浓度的 NAA。(5)获得试管苗后,需要在适宜的光照、温度和80%以上的湿度等条件下炼苗。鉴定目 的基因是否导入受体细胞时,可采用PCR技术对DNA进行扩增。(6)判断是否达到预期目的,即 确定已知花色基因是否导入牵牛花的核基因组中,可直接从个体水平将转基因植株与非转基 因植株的花色性状进行比较。素养解读 本题通过培育新花色的矮牵牛,考查了生命观念和科学探究。考点 植物组织培养教师专用题组1.(2014广东理综,29,16分)铁皮石斛是我国名贵中药,生物碱是其有效成分之一。应用组织培 养技术培养铁皮石斛拟原球茎(简称PLBs,类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程如下: 在固体培养基上,PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示,请回答下列问 题:(1)选用新生营养芽为外植体的原因是 ????,诱导外植体形成 PLBs的过程称 ????。 (2)与黑暗条件下相比,PLBs在光照条件下生长的优势体现在 ????,???? ????, ????。 (3)脱落酸(ABA)能提高生物碱含量,但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养,推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开 ... ...
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