第一节 细胞工程概述 1．了解细胞工程的发展。 2．掌握细胞工程的基本技术。(重、难点) 3．理解细胞工程的应用。(重点) 知识点一| 细胞工程及植物组织培养技术 1．细胞工程的发展 时间 科学家 实验过程 贡献 1907年 哈里森 用盖玻片悬滴培养蛙胚神经组织 开创了动物细胞培养的先河 1937年 高特里特 离体培养胡萝卜组织，并使细胞增殖 成功进行了植物组织培养 1972年 卡尔逊 用硝酸钠作为促融合因子，成功地将2个不同种的烟草细胞原生质体进行融合 获得了世界上第一个体细胞杂交植株 1996年 韦尔穆特 利用成年芬兰白面母羊体细胞的细胞核与苏格兰黑面母羊的去核卵细胞融合培养 首次克隆出绵羊“多莉” 2.细胞工程的概念及分类 (1)操作原理和方法：细胞生物学和分子生物学。 (2)操作水平：细胞或细胞器水平。 (3)操作条件：体外无菌条件下进行培养繁殖。 (4)操作目的：按照人的意愿去改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的综合性科学技术。 (5)分类： ①根据研究对象： a．植物细胞工程； b．动物细胞工程等。 ②根据使用技术： a．植物组织培养技术； b．细胞融合技术； c．细胞核移植技术等。 3．植物组织培养技术 (1)细胞全能性：含有一个物种全套遗传物质的细胞都具有发育成为一个新的生物个体的潜能，细胞的这种特性称为细胞全能性。 (2)植物组织培养：指依据细胞全能性原理，在无菌条件下，分离植物的器官、组织、细胞或原生质体，并在培养基上培养，在适宜的条件下使其发育成部分或完整植株的技术。 (3)培养材料：最常用的是植物的茎尖、根尖、幼嫩的叶片和花药等，也称外植体。 (4)一般过程： 外植体(分离的植物器官、组织、细胞或原生质体)(无菌，适宜的培养基) ↓脱分化 愈伤组织(一团没有特定结构和功能并处于旺盛分裂状态的薄壁细胞) ↓再分化 胚状体或根和芽 ↓ 完整植物体 (5)条件 (6)培养基的成分：通常包括水分、无机盐、碳源、氮源、维生素等。 (7)植物细胞的脱分化(或去分化)：由已经分化的植物细胞形成愈伤组织的过程。 (8)再分化：愈伤组织继续培养，重新诱导分化形成胚状体或根和芽等的过程。 下图所示为胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下，形成试管苗的培育过程，请据图分析： 探讨：在植物组织培养过程中，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作？ 提示：防止杂菌感染。 探讨：图中A是什么过程？为什么该过程要求“避光条件”下培养？B是什么过程？该过程也需要“避光条件”培养吗？ 提示：脱分化；脱分化过程中，光照易诱导分化产生导管等组织，不利于形成愈伤组织。再分化；再分化过程中一定要有光照，利于组织分化和分化出的芽、叶进行光合作用。 探讨：植物组织培养所用的培养基中在脱分化和再分化中起关键作用的激素是什么？ 提示：细胞分裂素和生长素。 探讨：从繁殖方式上看，植物组织培养属于哪种繁殖方式？为什么？ 提示：无性繁殖。植物组织培养是在细胞有丝分裂和细胞分化的基础上实现的，此过程并没有生殖细胞的产生，所以是无性繁殖。 1．对细胞全能性的理解 (1)理论依据 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 (2)细胞全能性的内涵和原因 ①内涵：高度分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。 ②原因：具有该物种的全部遗传信息。 (3)实现全能性的条件 材料 离体的植物细胞、组织或器官 培养基 种类齐全、比例合适的营养物质及一定的植物激素 外界条件 无菌操作、光照 (4)细胞全能性的标志：由细胞发育成完整的个体。 (5)不同细胞的全能性比较 ①受精卵(全能性最高)＞卵细胞(具有较高的潜在全能性)＞体细胞(全能性较低)。 ② ... ...
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