微专题突破 一、与核酸有关的各种酶的比较 名称 作用 参与生理过程应用 作用位点(如下图) DNA连接酶 连接两个DNA片段 基因工程 a 限制性核酸内切酶 切割某种特定的脱氧核苷酸序列 a DNA聚合酶 在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧核苷酸 DNA复制 a RNA聚合酶 在核糖核苷酸链上添加单个核糖核苷酸 转录及RNA复制 解旋酶 使碱基间氢键断裂形成单个脱氧核苷酸链 DNA复制及转录 b 逆转录酶 以RNA为模板合成DNA 逆转录、基因工程 a 1．在DNA连接酶的催化下形成的化学键和位置分别是( ) A．氢键 碱基与脱氧核糖之间 B．氢键 碱基与碱基之间 C．磷酸二酯键 磷酸与脱氧核糖之间 D．磷酸二酯键 脱氧核糖与碱基之间 【解析】 本题考查DNA连接酶的作用。DNA连接酶的作用只是催化DNA片段的“缝合”，能恢复被限制酶切开了的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，不能催化氢键形成。 【答案】 C 2．下列黏性末端属于同种限制性核酸内切酶切割而成的是( ) A．①② B．①③ C．①④ D．②③ 【解析】 同种限制酶切割形成的黏性末端碱基能互补配对。 【答案】 B 3．下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( ) A．①②③④ B．①②④③ C．①④②③ D．①④③② 【解析】 将DNA分子切割成含有黏性末端的两个DNA片段的是限制性核酸内切酶，即①；DNA聚合酶则可以催化DNA单链的合成，即④；DNA连接酶可以连接具有相同黏性末端或平口末端的两个DNA片段，即②；解旋酶催化DNA双螺旋氢键的断裂，使DNA分子解旋，即③。 【答案】 C 二、DNA复制、PCR技术和DNA重组技术的比较 DNA复制 PCR技术 DNA重组技术 场所 细胞核 生物体外 生物体外 酶 解旋酶、DNA聚合酶 DNA聚合酶 限制性核酸内切酶、DNA连接酶 载体 不需要 不需要 需要 遵循原则 碱基互补配对 碱基互补配对 碱基互补配对 结果 DNA分子 DNA分子片段 DNA分子 4．下列有关PCR技术的说法，不正确的是( ) A．PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术 B．PCR技术的原理是DNA双链复制 C．利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列 D．PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA 【解析】 PCR是利用DNA双链复制的原理，将基因的核苷酸序列不断地加以复制，使其数量呈指数方式增加。利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知的目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。扩增的过程是目的基因DNA受热变性后解旋为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。 【答案】 D 5．以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是( ) A．催化①过程的酶是RNA聚合酶 B．④过程发生的变化是引物与单链DNA结合 C．催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温 D．如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与U之和也占该DNA碱基含量的40% 【解析】 据图分析可知，①②③④⑤过程分别表示反转录、DNA的复制、变性、复性和延伸。①过程由反转录酶催化完成；④过程表示当温度降至55～60 ℃时，引物结合到互补DNA链上。②过程表示DNA的复制，需在常温条件下完成；⑤过程在表示Taq酶催化作用下从引物起始进行互补链的合成，需在70～75 ℃的高温条件下进行，但催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶；在DNA分子中有T无U。 【答案】 B 6．请回答基因工程方面的有关问题。 (1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。 ①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_____。 ②在第_____轮循环 ... ...
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