2009江苏高考生物实验汇编：探究影响酶活性的因素

本资料来自于资源最齐全的２１世纪教育网www.21cnjy.com 21世纪教育网 实验四 探究影响酶活性的因素 一．实验目的： 1．探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。 2．培养实验设计能力。 二．方法步骤： 提出问题→作出假设→设计实验→（包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格）→实施实验→分析与结论→表达与交流。 实例1：比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率 一）．实验原理： 鲜肝提取液中含有过氧化氢酶，过氧化氢酶和Fe3+都能催化 ( http: / / www. / Subject / shengwu.html )H2O2分解放出O2。经计算，质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍 二）方法步骤： 步骤 注意问题 解释 取4支洁净试管，编号，分别加入2mL H2O2溶液 不让H2O2接触皮肤 H2O2有一定的腐蚀性 将2号试管放在900C左右的水浴中加热，观察气泡冒出情况，与1号对照 向3号、4号试管内分别滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液，观察气泡产生情况 不可用同一支滴管 肝脏研磨液必须是新鲜的 肝脏在制成研磨液 由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶，会影响实验准确性 因为过氧化氢酶是蛋白质，放置过久，可受细菌作用而分解，使肝脏组织中酶分子数减少，活性降低 研磨可破坏肝细胞结构，使细胞内的酶释放出来，增加酶与底物的接触面积 2-3min后，将点燃的卫生香分别放入3号和4号试管内液面的上方，观察复燃情况 放卫生香时，动作要快，不要插到气泡中 现象：3号试管产生气泡多，冒泡时间短，卫生香猛烈复燃，4号试管产生气泡少，冒泡时间长，卫生香几乎无变化避免卫生香因潮湿而熄灭 实例2：温度对酶活性的影响 一）实验目的： 1．初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。 2．探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。 二）实验原理： 1．淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。 2．淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖（淀粉水解过程中，不同阶段的中间产物遇碘后，会呈现红褐色或红棕色。）麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。 注：市售a-淀粉酶的最适温度约600C 三）方法步骤： 操作 注意问题 解释 取3支试管，编上号，然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液 另取3支试管，编上号，然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液 将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，分别放入热水（约600C）、沸水和冰块中，维持各自的温度5min 不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液 防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实验结果。 分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度5min 保持各自温度时间不能太短 淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间 在3支试管中各滴入1-2滴碘液，摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录 碘液不能滴加太多 防止影响实验现象的观察 用表格的形式显示实验步骤 序号 加入试剂或处理方法 试管 A B C a b c 1 可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL / / / 新鲜淀粉酶溶液 / / / 1mL 1mL 1mL 2 保温5min 600C 1000C 00C 600C 1000C 00C 3 将a液加入到A试管，b液加入到B试管，c液加入到C试管中，摇匀 4 保温5min 600C 1000C 00C 5 滴入碘液，摇匀 2滴 2滴 2滴 6 观察现象并记录 实例3：PH值对酶活性的影响 操作步骤：用表格开式显示实验步骤：（注意操作顺序不能错） 序号 加入试剂或处理方法 试管 1 2 3 1 注入新鲜的淀粉酶溶液 1mL 1mL 1mL 2 注入蒸馏水 1mL / / 3 注入氢氧化钠溶液 / 1mL / 4 注入盐酸 / / 1mL 5 注入可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL 6 600C水浴保温5min 7 加入斐林试剂，边加边振荡 2mL 2mL 2mL 8 水浴加热煮沸1min 9 观察3支试 ... ...