课件26张PPT。1、基因工程又叫做 _____ 或_____。 基因工程基因拼接技术DNA重组技术2、基本工具： “分子手术刀” “分子缝合针” 基因进入受体细胞的载体3、基本操作步骤：运载体 DNA连接酶限制性内切酶1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建（核心） 3、将目的基因导入受体细胞（转化） 4、目的基因的检测与鉴定 基础回顾专题1 基因工程1、了解基因工程的诞生过程 2、理解基因工程的原理和技术 3、理解基因工程在工农业、 医药卫生等的应用学习目标基 因 工 程1、限制性核酸内切酶一种限制性内切酶只能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（切割DNA分子）来源：主要从原核细胞分离 作用： 作用结果：EcoRI重难点剖析基因工程的“专用工具”平未端（SmaI）及粘性未端（EcoRI）1、种类： 2、作用部位：磷酸二酯键 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。 DNA连接酶———分子缝合针”基因工程的“专用工具”运载体：常用质粒、 λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 质粒特点：1、细菌染色体外双链环状DNA分子 2、能自我复制并在受体细胞中稳定存在 3、有一个或多个限制酶切点 4、有特殊的遗传标记基因注意：真正用作运载体的质粒都 是人工改造过的。相关酶的分类比较 （一）目的基因的提取目的基因：主要是指_____。 获取方法： 1、_____中获取目的基因 2、人工合成法：化学方法合成DNA片段（DNA合成仪） 3、 PCR反应合成DNA 基本操作步骤从基因文库编码蛋白质的结构基因原理：DNA复制 过程：加热DNA解链 冷却引物结合到互补DNA链 互补链合成 条件 ：耐高温DNA聚合酶 （二）基因表达载体构建1、基因表达载体由_____、_____ _____、_____四部分组成。目的基因启动子标记基因终止子2、启动子作用：3、标记基因的作用：RNA聚合酶识别和结合的位点鉴别受体细胞中是否含有目的基因 筛选出含目的基因的细胞质粒DNA分子DNA连接酶过程:导入植物 细胞：（三）将目的基因导入受体细胞导入动物 细胞：导入微生物细胞：受体细胞 导入方法体细胞 受精卵受精卵 显微注射法Ca2＋处理法目的基因是否插入转基 因生物染色体的DNA：（四）目的基因的检测与鉴定目的基因是否表达：目的基因是否转录：鉴定———抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等检测—DNA分子杂交示意图 采用一定的技术手段，将两种生物的DNA分子的单链放在一起，如果这两个单链具有互补的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序列的部位，仍然是两条游离的单链。 1、抗虫转基因植物 方法： 从某些生物中分离出具有杀虫活性的 基因，将其导入农作物中，使其具有 抗虫性Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集 素基因等（一）植物基因工程硕果累累2、抗病转基因生物目的基因包括：病毒外壳蛋白基因、病毒的复制酶基因、抗真菌转基因植物中的有几丁质酶基因和抗毒素合成基因3、抗逆转基因作物 4、利用转基因改良植物的品质 方法：基 因 工 程 的 应 用用转基因动物生产药物--动物乳腺生物反应器（二）动物基因工程前景广阔 用转基因动物作器官移植的供体 供体动物： 存在的难题： 解决方法：猪免疫排斥将供体基因组导入某种基因调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。（三）、基因工程药品异军突起 工程菌：用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系。 我国已生产的产品：白细胞介素-2、干扰素、乙肝疫苗等（四）基因诊断与基因治疗 基因诊断：用放射性同位素等标记的“DNA探针 ... ...
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