课件39张PPT。第16讲 基因工程、细胞工程-2-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练PCR、基因工程及转基因技术的安全性 1.PCR技术 (1)PCR的过程-3-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练(2)PCR与DNA复制的比较 -4-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练-5-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练2.基因工程的主干知识图解 -6-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练3.基因工程的基本工具-7-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练4.基因工程的操作程序 (1)目的基因的获取 ①从基因文库中获取。 ②利用PCR技术扩增:其实质是在体外对目的基因进行大量复制。 ③用化学方法人工合成 a.对于核苷酸序列已知的直接人工合成。-8-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练(2)基因表达载体的构建 ①基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因。 ②基因表达载体的构建方法-9-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练(3)将目的基因导入受体细胞 -10-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练(4)目的基因的检测和鉴定-11-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练思维拓展 从“基因表达”层面理解启动子和终止子 启动子是RNA聚合酶的结合位点,启动转录;终止子是终止转录的位点。插入的目的基因是结构基因,其表达需要调控序列,因而用作载体的质粒的插入部位前面需要有启动子,后面需要有终止子。-12-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练题型1 透彻理解基因工程的原理,解答相关题目 大豆花叶病是世界性大豆病害,是造成大豆减产的重要原因。某科研小组制备了大豆花叶病毒(RNA病毒)的空衣壳蛋白(CP蛋白),生产过程大致如下,请回答问题。-13-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练(1)图中的①是指 。? (2)过程Ⅱ中应用的酶是 。在此过程前,先要在大豆花叶病毒的基因文库中查找 的核苷酸序列,以便合成特异性引物。? (3)在上述生产流程中, (填序号)是基因工程生产CP衣壳蛋白的核心步骤。为检测样液中是否含有有效成分,在Ⅶ可使用 进行检测。?答案 (1)RNA (2)TaqDNA聚合酶 CP蛋白基因(控制CP蛋白合成的RNA片段) (3)Ⅲ CP蛋白的抗体-14-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练1.金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题。-15-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练(1)从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA,通过 获得 用于PCR扩增。? (2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的 位点。设计引物时需要避免引物之间 ,而造成引物自连。 (3)图中步骤1代表 ,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。? (4)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏 的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但 的引物需要设定更高的退火温度。? (5)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有__ (填序号:①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物)。?-16-命题点一命题点二整合提升题型突破题组训练答案 (1)逆转录 cDNA (2)限制性核酸内切酶切割 碱基互补配对 (3)变性 (4)引物与模板 GC含量高 (5)②③ 解析 (1)根据mRNA获取目的基因的方法是先通过逆转录获得cDNA,然后通过PCR扩增。(2)构建重组质粒时,要用限制性核酸内切酶对质粒和含目的基因的DNA进行酶切,所以为方便构 ... ...
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