2019-2020学年苏教版生物选修一新素养同步课件学案与练习（71张PPT）：第一章　第二节　分离特定的微生物并测定其数量

第二节　分离特定的微生物并测定其数量 学习导航 明目标、知重点难点 了解、分析选择分离微生物的条件。(重点) 简述选择分离微生物并进行计数的方法。(重、难点) 学会从土壤中分离出能分解纤维素的微生物的方法。(重点) [学生用书P14]) 一、阅读教材P17～18分析微生物的分离 1．原理：在实验室中利用选择培养基可以筛选和分离出某种微生物，然后在高度稀释的条件下，在固体培养基上培养该微生物形成的单个菌落，即为纯培养物。 2．方法：平板分离法，包括涂布平板法和混合平板法。 3．选择培养分离：科学家针对某种微生物的特性，设计一个特定的环境，使之特别适合某种微生物的生长，而抑制其他微生物的生长。这种通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术，称为选择培养分离。 4．根据菌落特征初步分离 (1)菌落的含义：是指单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度，形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。 (2)菌落特征：不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落一般都具有稳定的特征，如菌落的大小、形状、边缘特征、隆起程度、颜色等，这些可以作为对微生物进行分类、鉴定的重要依据。 二、阅读教材P19～22完成土壤微生物的分离、培养与数量测定 1．涂布平板法培养和计数土壤微生物 (1)准备实验器材：所有玻璃器皿灭菌前需要用适当浓度的浓硫酸浸泡24 h。 (2)采集土壤，制备悬液 ①制备悬液：称取0.5 g土壤样品，倒入盛有50 mL无菌水的锥形瓶，振荡20 min，使土样充分打散，即为10－2 g/mL的土壤悬液。 ②等比稀释：用无菌移液管吸取0.5 mL土壤悬液注入盛有4.5 mL无菌水的1号试管，配成10－3 g/mL的土壤悬液。取另一支无菌移液管吹吸1号试管3次，使悬液均匀，再吸取0.5 mL注入盛有4.5 mL无菌水的2号试管，配成10－4 g/mL的土壤悬液。以此类推，依次配制成10－5 g/mL、10－6 g/mL、10－7 g/mL、10－8 g/mL的土壤悬液。 (3)选择适于分离特定微生物的培养基：利用不同微生物代谢特性的不同，通过选择培养基选出所需要的特定微生物。 (4)接种：用3支无菌移液管分别吸取10－8 g/mL、10－7 g/mL、10－6 g/mL的土壤悬液各1 mL加入培养皿中，每个浓度设置3个重复，并充分振荡混合均匀，用涂布平板法进行分离。 (5)培养与观察：将培养皿倒置于37_℃恒温箱中培养1～2 d，观察细菌菌落。 (6)计数菌落：培养1～2 d后取出平板，计数，选取菌落数为30～300的一组为样本进行统计。每克土壤样品的细菌数＝某一稀释度几次重复培养后的菌落平均数×稀释倍数(假定涂布所用稀释液为1 mL)。 2．显微镜直接计数法 (1)原理：此法利用特定的血球计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。血球计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特定的面积1 mm2和高0.1 mm的计数室，在1 mm2的面积里又被划分成25个(或16个)中格，每个中格进一步划分成16个(或25个)小格，但计数室都是由400个小格组成的。 (2)操作：将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，用无菌毛细吸管吸取摇匀的土壤微生物培养液，在盖玻片边缘滴一小滴，让培养液通过毛细渗透作用自动进入计数室。然后在显微镜下计数4或5个中格中的细菌数，并求出每个小格所含细菌的平均数，再按公式求出每毫升样品中所含的细菌数。 (3)计算公式：每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400×104×稀释倍数。 三、阅读教材P22～23完成分离土壤中能分解纤维素的微生物 1．实验原理：纤维素分解菌可以分泌纤维素酶，在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能很好地生长，其他微生物则不能生长。 2．筛选方法：刚果红染色法。如果发现菌落周围出现透明圈，则这些菌落就是能分解纤维素的细菌形成的。 判一判 (1)菌落是肉眼鉴别微生物不同种类的重要依据。(√) (2) ... ...