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课件网) 一、动物细胞融合的概念、过程 二、单克隆抗体的制备过程和应用 一、概念、动物细胞融合也称 ,是指两个或多个动物结合形成一个的过程, 细胞杂交 物理法 化学法 生物法: 灭活的病毒 仙台病毒 丧失感染性 (不感染细胞) 保留融合活性 (诱导细胞融合) 1.过程: 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 (同左) 灭活的病毒 物理(离心、振动、电刺激) 化学(聚乙二醇) 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 1.过程: 二、动物细胞融合(细胞杂交)-2个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 动物细胞的融合与植物细胞之间融合 植物细胞杂交与动物细胞杂交的比较 细胞膜 流动性 比较 项目 原理 方法 诱导手段 用途 植物 动物 制备单克隆抗体 1、常规抗体获得的方法及其特点 2、单克隆抗体制备的原理 ◆ 利用 产生特异性抗体的功能。 ◆ 利用 无限增殖的特性。 ◆ 利用 技术将两种细胞融合获得 杂交瘤细胞。 ◆ 利用 技术大量培养杂交瘤细胞。 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 动物细胞融合 动物细胞培养 3、单克隆抗体的制备 4、单克隆抗体的应用 (选择培养基) (抗体检测) 植物体细胞杂交的意义: 打破生殖隔离,克服远缘杂交不亲和的障碍,培育作物新品种 1.其由何种细胞产生? 2.主要分布在哪里? 3.如何得到抗体? 抗体 1。抗原 动物体内 抗原不纯 抗体不纯 2。特异性差、纯度低; 产量低、反应不够灵敏 设计方案: 一个B淋巴细胞--只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞--能无限增殖 -化学性质单一、特异性强的抗体。 杂种细胞 ? ? 诱导其融合的方法有哪些? 抗原 效应 B细胞 2.制备过程: B BB B瘤 瘤瘤 瘤 细胞融合后培养液中有几种细胞 已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径,但一般不分裂增值。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增值,将这两种细胞在试管中混合,加PEG促融,获得杂种细胞。 3.单克隆抗体的应用: ①在基础理论研究中具有重要意义 ②在疾病诊断、治疗和预防方面,具有 特异性高、灵敏度高等优越性。 ③生物导弹 一种诱导细胞融合的新方法 一种新细胞 一个优势 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓疤细胞融合的是( ) A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的B淋巴细胞 A 2..动物细胞融合的目的中最重要的是--( ) A.克服远缘杂交不亲和 B. 制备单克隆抗体 C.培育新品种 D.生产杂种细胞 3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中,正确的是( ) 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞 A D 4. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是--( ) A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D (MⅡ卵母细胞) 减数第二次分裂中期 去核的卵母细胞 供体细胞注入去核卵母细胞 受体细胞激活,完成减数分裂、发育 胚胎移植 P49 读下面一段文字资料,思考以下问题: 长期以来,为了获得抗体,采用的是把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出 ... ...