专题 2课题1《微生物的实验室培养》 【课程标准】 具体内容标准：进行微生物的分离和培养 活动建议： 用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落 【学习目标】 知识目标：1.举例说明有关培养基的基础知识 2.概述无菌操作技术包括的主要内容 能力目标：掌握纯化大肠杆菌的基本操作 【学习重难点】 重点：说出有关培养基的基础知识 难点：微生物培养中的有关实验操作 【自主探究案】 一、基础知识 （一）培养基 1.按照配置成的状态,培养基的种类包括 培养基和 培养基等。 2.培养基的化学成分一般都含有 、 、 、 四类营养成分。 3.在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对 、 _ 以及 等的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加 ；培养霉菌时需要将培养基的PH调至 ；培养细菌时需要将培养基的PH调至 ；培养厌氧微生物时需要提供_____的条件。 （二）无菌技术 1.获得纯净培养物的关键是 。避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容： ①对实验操作的 、操作者的衣着和手进行清洁和 。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行 。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_____附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与_____相接触。 2.消毒和灭菌 （1）消毒是指使用_____仅杀死物体表面或_____的部分微生物（不包括_____和_____）。常用的消毒方法有 、 。此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用 、 等。此外，实验室里还用 进行消毒。 （2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体_____的微生物，包括芽孢和孢子。常用的灭菌方法有 、 、 ， 二、实验操作： 1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 → → → →倒平板,往往在灭菌前还需要_____ 2.纯化大肠杆菌 微生物接种的方法中最常用的是 和 。 （1）平板划线法是指接种环在琼脂固体培养基表面_____的操作，将聚集的菌种_____到培养基的表面。 (2)稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列的_____，然后将不同_____的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度 的菌液时，聚集在一起的微生物将被分散成_____，从而能在培养基表面形成单个的_____，它在生态学上属于什么单位？_____. 三、结果分析与评价 1.如果接种大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色形状大小基本一致，说明接种符合要求。 2.若培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中_____未达到要求。 3._____(作为对照的培养基)，在培养过程中出现了菌落，则说明培养基_____不彻底，实验失败。 四、菌种的保存 1.对于频繁使用的菌种，我们可以采用 法；利用固体斜面培养基培养后，保 存在4℃冰箱中，每3～6个月转种培养一次，缺点_____。 2.对于需要长期保存的菌种，可以采用 法；温度为_____。 【合作探究案】 探究一：消毒与灭菌 1、无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？ 2、利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？ 3、在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？ 4、溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？ 探究二：有关“倒平板”操作 1.培养基灭菌后，需要冷却到500C左右，才能用来倒平板。你用什么方法来估计培养基的温度？ 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 探究三：有关“平板划线法”操作 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 3.在作第二次以及其后的划线操作是为什么总是从上一次划线的 ... ...
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