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课件网) 课题2 月季的花药培养 1964年，印度科学家在培养毛叶曼陀罗的花药时，首次获得了由花药中的花粉粒发育而来的单倍体植株。这个实验说明生殖细胞和体细胞一样，在离体条件下也具有发育成完整植株的潜能。 1.识记被子植物花粉发育的过程； 2.通过学习花药培养的基本技术，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力。 被子植物的有性生殖是在花里进行的，雌蕊和雄蕊是进行有性生殖的主要部分。 雌蕊 雄蕊 1.雄蕊 由花粉母细胞经过减数分裂形成的单倍体的生殖细胞. 2.花粉: 3.花粉发育阶段： 小孢子四分体时期；单核期；双核期 花粉管 精子 (2个) 卵细胞 极核 （一）被子植物的花粉发育 被子植物的花的结构是怎样的？ 观察下图，和减数分裂比较，你能指出对应的时期吗？又有何特点？ 小孢子 母细胞 4个 小孢子 1个小孢子 （单核居中期） 花粉管 细胞核 生殖 细胞核 营养 细胞 生殖 细胞 精子 精子 减数分裂 有丝分裂 有丝分裂 特点：细胞质浓厚 花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞 ②花粉粒的形成 ①经历时期： 四分体时期、单核期、双核期 四分体时期(小孢子) 精子 精子 有丝 分裂 花粉管细胞核 生殖细胞核 生殖细胞 营养细胞 双核期 两个精子和一个营养细胞的基因型相同 1个花粉母细胞 4个小孢子 减分 有分 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有分 8个精子 ① ② 移栽 （二）产生花粉植株的两种途径 体细胞胚：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似。 原因：培养基中的激素种类及浓度配比 愈伤组织发育途径 烟草花药培养 胚状体发育途径 （三）影响花药培养的因素 花期早期；单核居中期与靠边期之间 （三）影响花药培养的因素 ———材料的选择 花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。 为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。 只有某一个时期对离体刺激敏感。 最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期 措施？？ （一）材料的选取 选择花药时，一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 最常用的方法有醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 ①醋酸洋红法染色机理 醋酸洋红为碱性染色剂，而花粉细胞内有染色体，染色体主要成分是DNA和蛋白质,易被碱性染料着色染成红色 。 ②醋酸洋红的配置 2、醋酸洋红法 将体积分数45％的醋酸100ml煮沸，缓缓加入1g洋红，在加热回流8h，冷却至50℃，过滤即可。 将花药放在载玻片上，加一滴质量分数1％的醋酸洋红，用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片在显微镜下检查。 ③染色操作 3、焙花青—铬钒法 将无水酒精与冰醋酸按体积比为3 ：1的比例混匀 ①卡诺氏固定液的配制方法 将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸馏水中，溶解后加入0.1g焙花青，混匀并加热至沸腾，煮沸5分钟后冷却至室温，过滤，加蒸馏水定容至100ml。 ②焙花青—铬钒溶液的配制方法 花药应该在卡诺氏固定液中固定20min，然后取出放在载玻片上，加焙花青—铬钒溶液染色，盖上盖玻片后在显微镜下检查。 ③染色操作 （二）材料的消毒 1、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） 5、无菌水冲洗3～5次 ②要彻底去 ... ...
