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课件网) 土豆发芽 落地生根 1958，美国 斯图尔德 课题1 菊花的组织培养 植物组织培养的基本过程 离体条件下利用人工培养条件在无菌情况下培养、生长、发育再生出完整植株的过程。 植物组织培养的理论基础： 细胞全能性：具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。 细胞全能性表达条件： 离体、一定的营养物质、激素和其他 外界条件 基础知识--相关概念 2.细胞分化： 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、 结 构、生理功能上发生稳定性差异的过程 基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果 形成各种组织器官 结果： 原因： 3.脱分化： 由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，又叫去分化。 概念： 1.外植体：由用于离体培养的植物器官或组织等。 脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官。 5.再分化： 愈伤组织是外植体通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 4.愈伤组织 影响植物组织培养的因素： 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 菊花的组织培养：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 （1）、外植体的选取 （2）MS固体培养基成分及比例 同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ MS培养基：无机营养为主，蔗糖为碳源、常加激素 （2）、培养基的配制(MS培养基) 大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 讨论（ 33页）：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 微量元素和大量元素———无机盐； 蔗糖———碳源，维持细胞的渗透压； 甘氨酸、维生素等———代谢受影响后的特殊营养需求。 微生物培养基以有机营养为主。 MS培养基以无机营养为主、蔗糖为碳源、常加激素。 ①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素 生长素类： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA） 细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤（ 6－BA）、玉米素（ZT） 赤霉素类： 赤霉酸（GA3） （3）植物激素的影响 ②生长素和细胞分裂素作用 启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势 使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但不利分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率高 生长素 细胞分裂素： > 有利于根的分化 生长素 细胞分裂素： < 有利于芽的分化，抑制根的分化 生长素 细胞分裂素： ＝ 促进愈伤组织生长 ③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响 （5）、消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境 原因？ （4）、pH、温度、光照 菊花： pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 实验操作 移 栽 实验操作 （一）制备MS固体培养基 1、配置各种母液 2、配置培养基 ①定容 ② 调PH ③培养基的分装 3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 （二）外植体消毒 2、消毒： 流水冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 （三）接种 用70％的酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟 1、接种室消毒 2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需 ... ...
