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课件网) 1.什么是微生物？ 2.什么是菌落？ 3.如何灭菌？以达到所利用微生物不被其他微生物污染。 4.什么是LB液体培养基和LB固体培养基？ 微生物 原核类: 真核类 非细胞类： 特点： 细菌、支原体、放线菌、蓝藻（蓝细菌） 个体微小、结构简单 酵母菌、霉菌、食用菌 真菌： 原生动物： 草履虫、变形虫等 显微藻类： 衣藻、小球藻 病毒 一、基础知识： (一)什么是微生物 放线菌 单细胞分支状生物 结构： 应用： 链霉素、四环素、红霉素等抗生素多数由放线菌放出的。 二.什么是菌落： 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 细菌菌落：表面光滑而湿润，有粘稠性，多数透 明或半透明，有的是干燥有皱褶的。 放线菌菌落：表面是紧密的绒状、坚实多皱，长孢子后成粉末状，表面有不同的颜色。 酵母菌菌落：表面光滑而湿润，有粘稠性，大多是乳白色。 霉菌菌落：绒毛状，孢子有各种颜色。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 菌落 细菌的菌落特征因种而异 细菌的外形 球菌 杆菌 弧菌 细菌的构造 细菌分类 细菌 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 （细胞壁结构不同） 细胞壁厚，无荚膜，多产生外毒素，对青霉素更为敏感。 细胞壁薄，有荚膜，多产生内毒素 金黄色葡萄球菌等 大肠杆菌 P24 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。 注意芽孢和孢子的区别： 芽孢： 孢子： 是细菌产生的休眠结构，使细菌度过不良环境。 是细菌、真菌等的繁殖结构。 一、基础知识： （二）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。 1.培养基的类型和用途 液体培养基：增菌 固体培养基：分离纯化，增菌，鉴定菌落、活菌计数 2.不同的微生物往往采用不同的培养基配方。 基本营养要素： 还要考虑的因素？ PH、渗透压等的要求。 水、碳源、和氮源、 无机盐营养物质， 灭菌 二、无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 灭菌 消毒 达到完全无菌 原理： 获得纯净培养物的关键是防止其他杂菌的入侵。 1、灼烧灭菌 2、高压蒸气灭菌 ?1kg/cm2压力下、121 ℃下维持15min 0.5kg/cm2压力下下维持30min. 3、紫外线处理 4、化学试剂处理 无菌操作的具体常用方法： 高压蒸汽灭菌 它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。 为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。 而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。 实验操作程序 1、培养基的配制 2、器具、培养基的灭菌 3、倒平板 实验操作程序 1、培养基的配制 2、器具、培养基的灭菌 3、倒平板 如何判断？将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。 倒平板注意事项： 1）、在火焰倒； 2）、平板冷凝后，要将平板倒置（为什么）？ 3）、在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 3. 4. 答：防止皿盖上的水珠落入培养基，使细菌随水扩散，造成污染。 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 实验操作程序 1、培养基的配制 2、器具、培养基的灭菌 3、倒平板 4、扩增 将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检 ... ...
