动物细胞融合和单克隆抗体 一、学习目标 1.理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。 2.理解和掌握单克隆抗体制备的过程的步骤和应用。 二、重点难点 重点:了解单克隆抗体的制备和应用。 难点:了解单克隆抗体制备过程中两次筛选的作用。 三、学习过程 【温故知新】 1.简要说明植物体细胞杂交的过程。 2.植物原生质体融合的原理是 。 3.植物体细胞杂交的意义是 。 【课前预习】 (一)动物细胞融合 1.概念: 或 动物细胞结合形成一个细胞的过程,也称细胞杂交。 2.结果:形成 。 3.动物细胞融合原理:细胞膜的 。 4.诱导动物细胞融合的方法: 物理方法: 。 化学方法: 。 生物方法: 。 5.过程:两个或多个细胞在灭活的病毒或PEG的作用下 。 6.意义:克服了 的不亲和性,成为研究 、 、肿瘤和 培育的重要手段。 (二)单克隆抗体 1.抗体 (1)产生细胞: 。 (2)特点:从 中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。 (3)成分: 。 2.单克隆抗体的制备 (1)过程: ①给小鼠注射特定的抗原蛋白质,进行免疫。 ②从 中分离出能产生抗体的效应B细胞。 ③将效应B细胞与培养的 细胞诱导融合,可能形成三种类型的融合细胞: 、 、 。 ④进行选择性培养得到 瘤细胞。 ⑤克隆化培养,专一抗体检测阳性,得到足够数量的能分泌所需要抗体的细胞。 ⑥ 培养,或者体外培养。 ⑦得到单克隆抗体。 (2)杂交瘤细胞的特点: 、 。 (3)单克隆抗体的优点: 、 、 。 3.单克隆抗体的应用 (1)作为诊断试剂,具有_____、_____、_____、_____的优点。 (2)用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗 、可制成 。 【课内探究】 (一)动物细胞融合 结合教材P52第三、四自然段,填写下表。 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞融合的方法 用 去除细胞壁后诱导原生质体融合 用 使细胞分散后诱导细胞融合 诱导手段 除应用植物细胞杂交手段外,还有用 结果 应用 培育植物新品种 主要 意义 相同点 原生质体融合原理相同,原生质体融合的方法相似 探究: 1.为什么灭活的病毒可以诱导动物细胞融合?不灭活的病毒可以吗? 2.动物细胞融合后能培养形成杂种动物个体吗? (二)单克隆抗体 探究1:关于抗体的产生 ①抗体由什么细胞产生?传统的抗体生产方法及缺点是什么? ②一种抗原侵入机体后,引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗?一种效应B淋巴细胞能产生几种抗体? 探究2:关于B淋巴细胞 ①在体外培养的条件下,一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖?若要想获得大量的单一抗体,如何做呢? ②有什么办法可以让B淋巴细胞无限增殖? 探究3:关于单克隆抗体的制备过程 ①如何获得能产生所需抗体的B淋巴细胞? ②如果把多个B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时,一定会全部发生融合吗?仅考虑两两融合的话会有几种融合类型? ③符合要求的杂交瘤细胞是如何筛选出来的?能产生所需单一抗体的杂交瘤细胞是如何筛选出来的? ④如何利用杂交瘤细胞来生产抗体? ⑤单克隆抗体制备过程用到了哪两种技术?制备原理是什么? 探究4:关于单克隆抗体的应用 ①单克隆抗体的“单克隆”怎样理解?该抗体有何特点? ②基于单克隆抗体的优点而制备的“生物导弹”是怎么回事? 四、自主练习 1.关于动物细胞融合的说法,不正确的是( ) A.动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 B.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞 C.常用的诱导动物细胞融合的因素有:聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射 D.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能 2.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交瘤细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的细胞 ... ...
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