6.2 基因工程及其应用（共37张PPT）

第2节 基因工程及其应用 第6章 从杂交育种到基因工程 能发光的水母 能发荧光的热带斑马鱼 能产生人胰岛素的大肠杆菌 抗虫害的玉米 基因工程：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的性状。 原 理： 操作水平： 操作环境： 结 果： 一、　基因工程的原理 基因重组。 DNA分子水平。 生物体外。 定向地改造生物的性状，获得人类所需要的品种。 二、基因工程的操作工具 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。 特点： (专一性) 实例: 大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ) 能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 主要是从原核生物中分离和纯化 来源: 1、“基因剪刀”——— 限制性核酸内切酶(限制酶) G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G (黏性末端) (黏性末端) 中轴线 A 磷酸二酯键 G A 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？不同的限制酶呢？ A A T T C G G C T T A A 磷酸二酯键 磷酸二酯键 CTTCATGAATTCCGTAGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGCATCTTAAGGGATT 练习使用EcoRI 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 要想获得某个目的基因必须要用限制酶切几个切口？ 可产生几个黏性末端？一个目的基因有几个黏性末端？ XbaⅠ TCTAGA AGATCT CATATG GTATAC NdeⅠ 学以致用： T AGATC CTAGA T CA GTAT TATG AC 2、“基因针线”———DNA连接酶 脱氧核糖和磷酸交替连接的DNA骨架的缺口 磷酸二酯键 G C T T A A A A T T C G A A T T C G G C T T A A 磷酸二酯键 磷酸二酯键 基因的针线———DNA连接酶 磷酸二酯键 使用DNA连接酶制作重组DNA分子 甲片段 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 乙片段 GGCATCTTAA AATTCCGTAG GGCATCTTAA AATTCCGTAG 作为运载体必须具备哪些条件？ 3、基因的运输工具———运载体 ①能够复制并稳定地保存。 ②具限制酶切点，以便与外源基因连接。 ③具有某些标记基因，便于进行筛选。 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒； 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒。 质粒 细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子，能稳定地独立存在于染色体外，并传递到子代。 现在常用的质粒大多数是经过改造或人工构建的，常含抗生素抗性基因，是重组DNA技术中重要的工具。 大肠杆菌的质粒： 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因（又称标记基因），如四环素抗性基因，携带这个基因的细菌对四环素具有抗药性。 （标记基因） 重组质粒 DNA连接酶 …… CTTAA G CTTAA G CTTAA G CTTAA G 目的基因 相同的限制酶 三、基因操作的基本步骤： 1、提取目的基因 2、目的基因与运载体结合 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的表达与鉴定 目的基因 供体细胞 受体细胞 1、提取目的基因 2、目的基因与运载体结合 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 基因工程操作基本步骤: 1.下列关于基因工程的叙述中,正确的是（ ） A.限制酶只用于提取目的基因 B.细菌体内的环状DNA均可作运载体 C.DNA连接酶可用于目的基因和运载体的连接 D.重组DNA分子一旦进入受体细胞,基因工程则完成. 2.以下说法正确的是（ ） A.目的基因是指重组DNA B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C. ... ...