2020-2021学年高二生物人教版选修三2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 课件 （25张PPT+2个视频）

(课件网) 全球首个BTLA靶点单抗药物临床获FDA受理 降价超一半17种抗癌药纳入医保西妥昔单抗注射液降3000元 2.2 动物细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 必修一P67 思考： （1）该实验可以说明_____。 （2）该实验使用的研究方法是_____。 （3）诱导两种动物细胞融合的常用诱导剂是_____。 细胞膜具有流动性 荧光蛋白标记法 聚乙二醇PEG 灭活的病毒 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 一、动物细胞融合 1.概念： 动物细胞融合（cell fusion）也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传物质的单核细胞，称为杂交细胞。 2.融合过程： 取不同DNA的两个细胞 灭活的病毒诱导 细胞融合 杂交细胞 3.诱导方法： 物理法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒 电激等 聚乙二醇（PEG)等 一、动物细胞融合 5.意义： 克服远缘杂交不亲和的障碍，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 6.应用： 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段； 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体 4.原理： 细胞膜的流动性 植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 融合原理 融合前的处理 使用的酶 诱导方法 主要用途 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 纤维素酶、果胶酶 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 物理(离心、振荡、 电刺激)、化学(聚乙二醇) 物理、化学方法(同左) 灭活的病毒 获得杂种植株 制备单克隆抗体 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 分册二P43-44 二、单克隆抗体 思考 ？ ①什么是抗体？ ②抗体如何产生？ ③用传统的方法如何获得抗体？有什么缺陷？ 抗体是机体受____物质刺激，由____细胞产生的，能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的_____。 抗体 抗原 B细胞 刺激 增殖 分化 浆细胞 分泌 把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。 缺陷：纯度低、产量低、特异性差。 抗原 浆 球蛋白 1、设计方案： 1975年，米尔斯坦和科勒的实验方案： 是指化学性质单一、特异性强的抗体。 二、单克隆抗体 单克隆抗体制备过程 ◆ 利用_____产生特异性抗体的功能。 ◆ 利用_____无限增殖的特性。 ◆ 利用_____技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。 ◆ 利用_____技术大量培养杂交瘤细胞。 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 动物细胞融合 动物细胞培养 B淋巴细胞间的融合、 骨髓瘤细胞间的融合 B淋巴细胞与骨髓瘤细胞间的融合形成的杂交瘤细胞 骨髓瘤细胞 单克隆抗体 筛选 克隆、筛选 体内培养 注射到小鼠腹腔 体外培养 B淋巴细胞 (选择培养基) (专一抗体 检验阳性) 细胞融合 杂交细胞 2、制备过程： 特异性强，灵敏度高，并且可以大量制备 免疫小鼠 1)本过程利用了哪些原理或技术？ 2)为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 思考： 免疫学原理、细胞融合原理、动物细胞培养原理 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B淋巴细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体。 3)整个制备过程为何要经过两次筛选? 思考： 第一次筛选得到杂交瘤细胞。 第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 3.单克隆抗体的应用 二、单克隆抗体 3.单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体的优点是特异性强，灵敏度高，并且可以大量制备。 二、单克隆抗体 （1）作为诊断试剂：这是单克隆抗体最广泛的用途，具有_____的优点。 （2）用于治疗疾病和运载药物： 在临床上主要用于癌症治疗。 运 ... ...