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课件网) 了解有关微生物及培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。 一、课题目标: 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术,熟练、规范地进行无菌操作,成功地培养微生物。 无菌技术的操作。 二、课题重点和难点: 三、技能目标: 微生物包括哪五类: 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 特点:结构简单,形体微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 一、基础知识: (一)微生物 细菌的外形与大小 细菌:单细胞不分枝的原核微生物。 细菌细胞微小而透明,通常用适当染料染色后显微镜观察 图1-1 常见的三种细菌典型形态 A.球菌 B.杆菌 C.弧菌 细菌的构造 细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌(纤)毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质,细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等。 图1-3 细菌的结构 *细胞壁 结构特点:坚韧且有弹性 细胞壁有哪些功能? ①固定细胞外形; ②保护细胞免受外力的损伤; ③阻拦大分子物质进人细胞; ④使细胞具有致病性及对噬菌体的敏感性。 伤寒杆菌细胞壁中含毒素 有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌. 菌落: 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 菌落 细菌的菌落特征因种而异 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同,将细菌分为两大营养类型。 自养菌:分类,举例 异养菌: 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 光合自养型:光合细菌 化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌 放线菌 1、结构: 单细胞原核 分支状的菌丝(基内菌丝、气生菌丝) 链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素 微生物中发现了几千种抗生素,其中2/3是 由放线菌产生的 应用: 病毒的结构 2、病毒的增殖: 真菌 一、基础知识: (二)培养基 培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 (1)按物理状态分:固体培养基和液体培养基、半固体培养基。其中固体培养基用于菌种保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等,半固体培养基可观察微生物的运动,液体培养基常用于发酵工业。 (2)按功能分:选择培养基和鉴别培养基。 (3)按成分分:天然培养基和合成培养基。 1.培养基的类型和用途 选择培养基 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基: 分离杂交瘤细胞 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。 优点:营养成分丰富,培养效果好 缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染; 根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。 优点:标准化生产,组分和含量相对固定;成本低 缺点: 缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。 合成培养基: 天然培养基: 血清中含有: ①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等) ②多种金属离子 ... ...