【生物新高考一轮复习】热点微练29　PCR技术的应用（word版含解析）

中小学教育资源及组卷应用平台 【生物新高考一轮复习】 热点微练29　PCR技术的应用 1.(2021·江西南昌四校联考)2019年6月17日，新华社报道了屠呦呦及其团队经过多年攻坚，在“抗疟机理研究”“抗药性成因”“调整治疗手段”等方面取得新突破。之后屠呦呦团队提出应对“青蒿素抗药性”难题的切实可行的治疗方案。某课题组为得到青蒿素产量高的新品系，让青蒿素合成过程的某一关键酶基因fps在野生青蒿中过量表达，其过程如图： 重组质粒青蒿 回答下列问题： (1)图中酶1是　　　　，酶2是　　　　。利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是加热至90～95 ℃，目的是破坏DNA分子中的　　　　键。在构建重组Ti质粒的过程中，需将目的基因插入Ti质粒的　　　　　　　　。 (2)检验目的基因是否整合到青蒿基因组，可以将放射性同位素标记的　　　　制成基因探针，与青蒿基因组DNA杂交。理论上，与野生青蒿相比，该探针与转基因青蒿DNA形成的杂交带的量　　　　(填“较多”或“较少”)。 (3)据图分析，农杆菌的作用是　　　　　　　　　　　。为准确判断该课题组的研究目的是否达到，必须检测转基因青蒿植株中的　　　　　　　　。 答案　(1)逆转录酶　限制酶　氢　T－DNA　(2)fps基因　较多　(3)感染植物，将目的基因转移到受体细胞中　青蒿素产量 解析　(1)据图示可知，酶1促进逆转录的过程，故为逆转录酶，酶2用于切割目的基因和质粒，故为限制性内切核酸酶(限制酶)。利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是加热至90～95 ℃，目的是破坏DNA分子中的氢键。构建重组Ti质粒的过程中，需将目的基因插入Ti质粒的T－DNA。(2)检验目的基因是否整合到青蒿基因组，可用DNA分子杂交法，即将fps基因制成基因探针，与青蒿基因组DNA杂交。与野生青蒿相比，该探针与转基因青蒿DNA形成的杂交带的量较多。(3)将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，由图可知，农杆菌的作用是感染植物，将目的基因转移到受体细胞中。为准确判断该课题组的研究目的是否达到，必须检测转基因青蒿植株中的青蒿素产量，若产量增高，则说明达到了目的。 2.(2021·四川大数据统一监测)如图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程。回答下列问题： (1)进行Ⅰ过程的前提是要根据干扰素基因的　　　　　　　　设计引物。 (2)Ⅰ过程需加热至90～95 ℃，然后冷却至55～60 ℃，如此操作的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　。据图可知，欲获得干扰素基因，至少需要复制　　　　次。 (3)图中A的名称是　　　　，A上与RNA聚合酶识别和结合的部位称为　　　　。 (4)为检测干扰素基因在酵母菌细胞中是否转录，可用　　　　　　　　　　　　　　　　作探针，与从细胞中提取的　　　　进行分子杂交。 答案　(1)一段核苷酸序列　(2)使DNA解链，然后使引物结合到互补DNA链上　3　(3)重组质粒　启动子　(4)放射性同位素、生物素或荧光染料等标记的干扰素(目的)基因　mRNA 解析　(1)进行PCR的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成一对引物，因此进行Ⅰ过程的前提是要根据干扰素基因的一段核苷酸序列设计引物。(2)PCR过程中需加热至90～95 ℃，目的是使DNA双链解旋，然后冷却至55～60 ℃，目的是使引物结合到互补DNA链上。根据PCR复制的特点，结合图示可知，图示中干扰素基因的两条链均应是第二次复制才能形成的子链，所以至少需要复制三次才能形成图中的干扰素基因。(3)图中A是干扰素基因和质粒连接形成的重组质粒(或基因表达载体)，A上与RNA聚合酶识别和结合的部位称为启动子。(4)基因转录的产物包括mRNA，由于转录过程中遵循碱基互补配对原则，因此为检测干扰素基因在酵母菌细胞中是否转录，可用 ... ...