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课件编号19980443
1.2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件(共27张PPT)-人教版选择性必修3
日期:2024-05-12
科目:生物
类型:高中课件
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来源:二一课件通
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) 探究 实践 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (图片来源:作者拍摄) Q1:框线位置经过化粪池污物的堆积后,残留了很多 尿素,这些尿素会如何被植物利用? Q2:土壤中含有多少这样的细菌,我们如何分离 它们? 探究 实践 实验设计———土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 目的: 1.从土壤中分离能利用尿素的细菌 2.完成菌落的计数 3.了解能分解尿素的细菌在样品中的占比 实验思路: 1.从土壤中分离能利用尿素的细菌 ———配制相应的选择培养基 资料1 绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但是只有能够合成脲酶的微生物才能分解尿素。 CO(NH2)2+H2O 脲酶 2NH3+CO2 组分 含量 KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g H2O 定容至1000ml 2.菌落的计数 3.了解能分解尿素的细菌在样品中的占比 ———稀释涂布分离法 ———以牛肉膏蛋白胨培养基上的涂布结果为对照组 实验思路: 土壤取样 制备菌悬液与涂布平板 微生物的培养与观察 配制 培养基 稀释操作 确定分组 涂布操作 目的菌株的筛选和鉴定 菌落形态 观察与计数 实验思路: 土壤取样 微生物的培养与观察 制备 培养基 土样稀释 (制备菌悬液) 涂布平板 菌落 的计数 分析实验结果 制备培养基 ①牛肉膏蛋白胨培养基 ②以尿素为唯一氮源的选择培养基 土壤取样 ①取样地点: 细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长。 ②取样过程: 铲去表层土(一般3cm左右)。细菌绝大部分分布在距地表3~8cm的土壤层。 ③注意事项: 取土样时用的铁铲和取样袋,在使用前都需要灭菌,操作完成后一定要洗手。 在无菌条件下,将1g土样加到有99mL无菌水的三角瓶中,振荡10min,即成102倍稀释的土壤稀释液。依此法制备103、104、105、 106、107倍稀释的土壤稀释液。取样时,尽量只取悬液。摇匀,放在试管架上。 1g土样 99ml无菌水 不同倍数稀释液 土样稀释(制备菌悬液) (图片来源:常山一中陈美珍老师) 涂布平板 (图片来源:常山一中陈美珍老师) ★注意 测细菌时,一般选用104、105、106倍稀释的稀释液进行平板培养。在初次实验中,对于稀释的范围没有把握,应选择一个比较宽的范围,将103~107倍稀释的稀释液分别涂布到平板上培养,以保证能从中选择出菌落数在30~300的平板进行计数。 (图片来源:百度图片) 涂布平板 选择培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 (图片来源:百度图片) 涂布平板 Q1:每个浓度设置6个平板,1、2、3、4平板是尿素选择培养基, 5、6为牛肉膏蛋白胨培养基。每个培养基该如何涂布? 涂布平板 1 2 3 4 5 6 同一浓度的土壤稀释液 不进行涂布 与1、2、3同一浓度的土壤稀释液 Q2:如此涂布设置的目的是什么? 1、2、3作为实验组,且遵循平行重复原则。 4、5作为对照组一,若该培养基中无菌落生长,则说明未被杂菌污染。 6作为对照组二,判断尿素培养基是否具有选择作用,若该培养基上的菌落数目大于尿素培养基上的数目,则说明尿素培养基具有筛选作用。 涂布平板 1 2 3 4 5 6 同一浓度的土壤稀释液 不进行涂布 与1、2、3同一浓度的土壤稀释液 ①培养条件: 细菌一般在30 ℃~37℃的温度下培养1-2天。 (图片来源:百度图片) (图片来源:常山一中陈美珍老师) 微生物的培养与观察 微生物的培养与观察 ②观察: 每隔24h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果。 1 2 3 4 5 6 菌落的计数与实验结果分析 以1×105倍稀释的稀释液涂布结果为例: (46个菌落) (实验组平均3个菌落) 1 2 3 4 5 6 (0个菌落) 案例分析1:两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下两 ... ...
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