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课件网) 本节聚焦 动物细胞培养需要哪些基本条件? 动物细胞培养的基本操作过程是什么? 怎样客观分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险? 第2章 细胞工程 第2节 动物细胞工程 一 动物细胞培养 在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤? 可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增。 损“东墙” 补“西墙” 自体移植 人造皮肤 从社会中来 通过细胞培养构建的人造皮肤 一、动物细胞培养的条件 1.动物细胞工程常用技术 (1)常用技术: ________、_______和________等。 (2)基础:_______。 2.动物细胞培养 (1)概念: 动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成_____,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞____和___的技术。 动物细胞培养 动物细胞融合 动物细胞核移植 动物细胞培养 单个细胞 生长 增殖 目的:获得细胞或细胞产物 一、动物细胞培养的条件 2.动物细胞培养 (2)条件 糖类、氨基酸、无机盐、维生素······ 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 一、动物细胞培养的条件 (2)条件 ①营养 a.常用培养基的类型:___培养基,也称____。 b.成分:糖类、氨基酸、无机盐、维生素、___等。 液体 培养液 血清 胎牛血清 将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基,称为合成培养基。 人们对细胞所需营养物质尚未全部研究清楚,因此需要加一些天然成分 有利于培养的细胞与营养物质充分接触 一、动物细胞培养的条件 (2)条件 ②无菌、无毒的环境 a.需要对____和_______进行灭菌处理以及在____环境下进行操作。 b.培养液还需要_____。 细胞培养过程中,如何防止细菌等 微生物的污染? 定期更换 培养液 所有培养用具 无菌 在细胞培养液中添加一定量的抗生素。 一、动物细胞培养的条件 (2)条件 ②无菌、无毒的环境 a.需要对____和_______进行灭菌处理以及在____环境下进行操作。 b.培养液还需要_____。 定期更换培养液的目的是什么? 定期更换 所有培养用具 无菌 以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 培养液 (2)条件 ③温度、pH和渗透压 a.温度:哺乳动物细胞培养多以_______℃为宜。 b.pH:_____ c.适宜的渗透压 维持适宜渗透压的目的是什么? 维持细胞正常的形态和功能。 36.5±0.5 7.2~7.4 一、动物细胞培养的条件 (2)条件 ④气体环境 a.气体组成:动物细胞培养所需气体主要有____和_____。 b.培养操作:通常采用培养皿或松盖培养瓶,并置于含有 _____和_____的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 细胞代谢所必需的 O2 CO2 维持培养液的pH 95%空气 5%CO2 培养皿 培养瓶 一、动物细胞培养的条件 CO2 培 养 箱 二、动物细胞培养的过程 用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理,将组织分散成单个细胞 1.取动物组织 一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。 二、动物细胞培养的过程 原因 细胞的增殖能力与供体的年龄有关,幼龄动物的细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛,所以,细胞易于培养。同样,分化程度越低的细胞, ... ...