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课件网) 动物细胞融合技术与单克隆抗体 年 级：高二年级 学 科：高中生物学（人教版） 本节聚焦: 什么是动物细胞融合技术？ 单克隆抗体是如何制备的？ 单克隆抗体在临床上有哪些应用？ A细胞 B细胞 正在融合的原生质体 再生出细胞壁 脱分化 再分化 移栽 植物细胞融合 植物组织培养 杂种植株 愈伤组织 A原生质体 B原生质体 移栽后的植株 植物体细胞杂交技术 回顾旧知 实例： 1970年 人-鼠细胞融合实验 回顾--必修一：细胞膜的结构 1.概念： 使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 细胞膜的流动性 化学法：PEG融合法 动物细胞融合特有 杂交细胞：具有原来两个或多个细胞的遗传信息 一、动物细胞融合技术 物理法：电融合法 生物法：灭活病毒诱导法 2.原理： 3.融合方法： 是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活： 原理： 一、动物细胞融合技术 1.概念： 使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 细胞膜的流动性 化学法：PEG融合法 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。 动物细胞融合特有 一、动物细胞融合技术 ①研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。 ②利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 物理法：电融合法 生物法：灭活病毒诱导法 2.原理： 3.融合方法： 4.意义： 5.应用： 杂交细胞：具有原来两个或多个细胞的遗传信息 一、动物细胞融合技术 19世纪30年代，科学家曾在肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象？ 病人体内病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。 肺结核病人病理切片 植物体细胞杂交和动物细胞融合比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 基本原理 融合前处理 诱导方法 用 途 优 点 细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶、果胶酶去壁 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶 使细胞分散 培育新品种 制备单克隆抗体 电融合法、离心法 PEG，高Ca2+ —高PH融合法 电融合法， PEG融合法， 灭活的病毒 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 突破有性杂交的局限， 使远缘杂交成为可能 二、单克隆抗体的制备 抗体: 机体受抗原刺激后产生的，能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗体的分布： 血清(主要);组织液及外分泌液。(如乳汁中，为新生儿提供抗体) 早期获得抗体的方法: 动物体内 抗原 多种浆细胞 多种抗体（血清） 反复 注射 每一个浆细胞只能产生一种特异性抗体 体内产生的特异性抗体多达百万种 产量低，纯度低，制备的抗体特异性差、反应不灵敏 缺点: 动物会接触多种天然抗原，体内相应产生的特异性抗体种类可以达到百万种以上，但每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。因此，要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的淋巴细胞，形成细胞群。 在体外培养条件下，一个B淋巴细胞不可能无限增殖。因为单个B淋巴细胞寿命有限，又因为能产生抗体的B淋巴细胞属于高度分化的细胞，不可能无限增殖。 面临问题： 克隆化培养 有限稀释 二、单克隆抗体的制备 解决: 1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个极富创造性的试验方案： B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 由于发明了单克隆抗体的制备技术，米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖。 单克隆抗体 在体外培养条件下，能大量增殖 二、单克隆抗体的制备 二、单克隆抗体的制备 注射抗原 用特定抗原对小鼠免疫，并从其脾中获取能 ... ...
