第3章 基因工程——高二下学期生物学人教版（2019）期末考前提分练（含答案）

第3章 基因工程（非选择题） ———高二下学期生物学人教版（2019）期末考前提分练 1.大豆富含蛋白质等营养物质，真菌性病害严重影响大豆产量和品质，科研人员将几丁质酶基因导入大豆细胞，培育抗病新品种。图1为所用载体及限制酶切位点示意图，图2为PCR扩增几丁质酶基因的某个环节，表为各限制酶的识别序列及切割位点。回答下列相关问题。 名称 识别序列及切割位点 名称 识别序列及切割位点 HindⅢ EcoRⅠ BglⅡ PstⅠ KpnⅠ BamHⅠ （1）获得几丁质酶基因，可以从苏云金芽孢杆菌中提取RNA，通过_____酶得到DNA，再通过PCR技术扩增，PCR扩增的过程中，变性的目的是_____。若扩增过程中消耗了30个引物，则扩增了_____次。 （2）基因转录时，为保证几丁质酶基因能用B链充当转录模板，设计引物时应在图2引物I的5'端添加3'-_____-5'序列，经PCR扩增后，获得足量目的基因片段，再用_____两种限制酶分别切割质粒和几丁质酶基因两端，选择两种限制酶切割的目的是_____。 （3）将含几丁质酶基因的质粒导入农杆菌前，常用_____处理农杆菌，一般不能利用未处理的农杆菌作为受体细胞的原因是_____。 2.图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性内切核酸酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为、、、。 （1）限制性内切核酸酶切断的化学键所处的具体部位是_____。 （2）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1所示DNA片段，其产物长度分别为537bp、_____bp和_____bp。 （3）若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1所对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有_____种不同长度的DNA片段。 （4）若将图2中质粒和目的基因D通过同一种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是_____，理由是_____。 3.19世纪末，巴斯德开创了第一次疫苗革命，其特点是接种灭活或减毒的病原微生物。20世纪70年代开始，现代生物技术的迅猛发展开创了第二次疫苗革命，使疫苗的研制进入分子水平。图1是通过基因工程制备乙型肝炎表面抗原（HbsAg）从而获得乙肝疫苗的过程。 在图1步骤①和③中，需要用合适的限制酶切割乙肝表面抗原基因和质粒。乙肝表面抗原基因及质粒的部分限制酶的识别序列及位置如表和图2所示。质粒中的启动子是质粒中相关基因得以正常表达所必需的部分。LacZ基因能够合成某种酶，该酶能将无色的X-gal分解产生蓝色产物，最终在含X-gal的培养基上含该基因的菌落呈现蓝色。 限制酶 EcoRⅠ BclⅠ BamHⅠ HindⅢ 识别序列及切割位点 （1）制备乙肝疫苗的基因可以从基因文库中获取，与基因组文库中的基因相比，cDNA文库中的基因在结构上的特点是____，构建cDNA文库第一步需要____酶。 （2）为了避免自身环化及便于筛选，切割质粒选用的限制酶是____，切割乙肝表面抗原基因选用的限制酶是____。 （3）为筛选含有乙肝表面抗原基因的大肠杆菌细胞，需要将导入操作之后的大肠杆菌接种到含_____的固体牛肉膏蛋白胨培养基上，挑选_____的菌落纯化培养。 （4）在图1步骤④中，使用的基因工程工具酶是_____。在一个乙肝表面抗原基因与一个质粒重组的过程中（图1步骤④），游离的磷酸基团数目减少了_____个。 4.DHA俗称“脑黄金”，是一种对人体非常重要的多不饱和脂肪酸，对婴儿智力和视力发育至关重要，获取DHA产品的主要途径是从海洋渔业资源中提取（如鱼油）。研究人员将pfaB基因引入裂殖壶菌（一种单细胞海洋真菌），使其DHA合成量提高了5倍。下图为裂殖壶菌基因改造以及工业化发酵生产DHA的过程示意图，SapⅠ、HindⅢ、XhoⅠ、SmaⅠ是四种不同的限制酶。 （1）图中Tp和Tt分别为 ... ...