2-2-2动物细胞融合技术与单克隆抗体(教学课件)——高中生物人教版 (2019)选择性必修3(共24张PPT)

(课件网) 第2节动物细胞工程 Part2 动物细胞融合技术与单克隆抗体 单克隆抗体及其应用 01 动物细胞融合技术 目录/CONTENTS 温故而知新： 意义：打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种。 杂种植物 植物细胞融合 植物体细胞杂交 融合的 杂种 原生质(AB) 细胞(AB) 融合 再生 植物组织培养 再分化 ⑤ 脱分化 4 植物 细胞A 原生 质体B 新壁 ③ 植物 细胞B 原生 质体A ② 移栽 去壁 去壁 01 动物细胞融合技术 1、 概 念： 使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 2、原 理：细胞膜的流动性 物理法： 电融合法 与植物原生质体融 3、 诱导方式 化学法： 聚乙二醇 (PEG) 合的方法相同 生物法：灭活病毒诱导法———动物细胞融合特有 4、 结果：形成具有原来两个或多个细胞的遗传信息 的杂交细胞 细胞工程 病毒表面含有的糖蛋白和 一 些酶能够与细胞膜上的糖蛋 白发生作用，使细胞互相凝聚， 细胞膜上的蛋白质分子和脂质 分子重新排布，细胞膜打开， 细胞发生融合。 动物细胞融合实质及完成的标志：细胞核的融合 细胞工程 01 动物细胞融合技术 【拓展】 灭活病毒诱导细胞融合的原理 灭活的病毒粘 附使细胞凝聚 细胞核 融合 细胞膜 打开 细胞膜 融合 01 动物细胞融合技术 5、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 6、应用： ① 至今，种间、属间、科间，甚至动物 和植物之间的细胞融合都已获得成功。 ② 研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培 育生物新品种等的重要手段。 ③ 为制造单克隆抗体开辟了新途径。 正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞 细胞工程 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 步骤 酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体 融合，形成杂种体细胞，再经过植物 组织培养形成杂种植株 分散成单个细胞后诱导细胞融合 诱导方法 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、灭活病毒 结果 形成杂种植株 形成杂种细胞 意义 克服远缘杂交不亲和障碍 比较动物细胞融合与植物体细胞杂交 02 单克隆抗体及其应用 细胞工程 ③ 抗原呈递细胞 病原体 (如新冠病毒) ⑤ B细胞 02 单克隆抗体及其应用 抗体 1.定义：机体受抗原刺激后产生的，能与该抗原发 生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 1 ) 每 个B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体 2)体内产生的特异性抗体种类多达百万种以上 体液免疫 辅助性T细胞 ④ 细胞工程 记忆B 细胞 辅助性T细胞 浆细胞 细胞因子 抗体 ② ⑥ 1B淋巴细胞填浆细胞一→1抗体 (不能无限增殖) 02 单克隆抗体及其应用 1、传统抗体制备方法及缺陷 缺陷：产量低、纯度低，特异性差。 传统抗血清 (所有抗体混合) 1抗原 免疫 动物体内 1抗原 注射 1 1 杂交瘤细胞 又能产生专一抗体 杂交细胞 单克隆抗体 一种B淋巴细胞 (只分泌一种特异性抗体) 骨髓瘤细胞 (能无限增殖) 1975年，米尔斯坦和科勒 1984年，诺贝尔生理学或医学奖 02 单克隆抗体及其应用 个极富创造力的方案 动物细胞融合 动物细胞培养 既能迅速大量增殖， 细胞工程 用特定的选择培 养基进行筛选： 在培养基上，未 融合的亲本细胞 和融合的具有同 种核的细胞都会 死亡，只有融合 的杂交瘤细胞才 能生长。 将抗体检测呈阳性的杂交瘤细 胞在外条件下大规模培养，或 注射到小鼠腹腔内增殖。 注射到小鼠腹腔内 体外培养 单克隆抗体制备过程是怎样的 对上述经过选择培养的杂交 瘤细胞进行克隆化培养和抗 体检测，经过多次筛选，就 可获得足够数量的能分泌所 需抗体的细胞。 杂交瘤细胞(既 能迅速大量增殖 又能产生抗体) 02 单克隆抗体及其应用 用特定的抗原对小鼠进 行免疫，并从该小鼠的 脾中得到能产生特定抗 体的B淋巴细胞 抗体 ... ...