（12）重组DNA技术的基本工具——高二生物学人教版（2019）选择性必修三课堂速测（含解析）

（12）重组DNA技术的基本工具 ———高二生物学人教版（2019）选择性必修三课堂速测 基础检测 限制性内核酸酶———�分子手术刀” 1.来源：主要来自原核生物。 2.特点：具有 性。 （1）识别DNA分子的特定核苷酸序列。 （2）切割特定部位的两个核苷酸之间的 键。 3.结果： DNA连接酶———�分子缝合针” 1.作用：将 “缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 2.种类： 种　类 来　源 特　点 E.coliDNA连接酶 只能“缝合”具有 的双链DNA片段 T4DNA连接酶 T4噬菌体 既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的 末端 基因进入受体细胞的载体———�分子运输车” 1.种类：质粒、 、动植物病毒等。 2.常用载体———质粒 （1）本质：质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞 之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。 （2）作为载体的三个条件。 ①质粒DNA分子上有一个或多个限制酶切割位点。 ②能在细胞内自我复制，或整合到 上，随受体DNA同步复制。 ③含有特殊的标记基因。 3.DNA的粗提取与鉴定 1．实验原理 （1） 不溶于酒精， 溶于酒精。 （2）DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2_mol/L的NaCl溶液。 （3）在一定温度下，DNA遇 试剂会呈现蓝色。 2．实验步骤 （1）称取30 g洋葱，切碎，加入10 mL研磨液，充分研磨。 ↓ （2）漏斗中垫纱布，将研磨液过滤到烧杯中，4 ℃处理，取上清液。 ↓ （3）在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液，静置2～3 min，用玻璃棒沿同一方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去水分。 ↓ （4）取两支20 ml的试管编号A、B，各加入2 mol/L的NaCl溶液5 mL，将丝状物溶于B试管的NaCl溶液中。然后向两支试管中各加入4 mL的 试剂。混匀后，将试管置于沸水中加热5 min。 ↓ （5）结果观察：A试管 ，B试管变蓝色。 小试牛刀 1.限制性内切核酸酶EcoRⅠ识别并切割双链DNA，用EcoRⅠ完全酶切果蝇基因组DNA，理论上得到DNA片段的平均长度（碱基对）约为( ) A.6 B.250 C.4000 D.24000 2.下列物质，不属于基因工程所需最基本工具的是( ) A.X射线 B.DNA连接酶 C.质粒 D.限制性核酸内切酶 3.基因工程中用两种不同的限制酶切割某一环状DNA分子后，最终得到的片段有( ) A.1个 B.2个 C.3个 D.4个 4.下列关于DNA连接酶的理解正确的是( ) A.DNA连接酶的化学本质是蛋白质 B.DNA连接酶识别DNA分子上的特定碱基序列 C.DNA连接酶不能被反复使用 D.在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶 5.下列有关基因工程中载体的说法正确的是( ) A.基因工程的载体只有质粒 B.噬菌体可以作为动物基因工程的载体 C.质粒能够在宿主细胞中稳定保存，并在宿主细胞内复制 D.动物病毒不可以作为载体 6.下列有关基因工程的叙述，正确的是( ) A.基因工程是细胞水平上的生物工程 B.基因工程能定向改造生物的性状 C.基因工程的产物对生物都有利 D.基因工程引起的变异属于基因突变 7.基因工程技术也称为DNA重组技术，下列有关基因工程的说法错误的是( ) A.基因工程的基本原理是基因重组 B.基因工程常用的工具酶有限制酶、DNA连接酶和运载体 C.基因工程可以定向改造生物的性状 D.基因工程常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒 8.以下关于质粒的叙述不正确的是( ) A.质粒上有复制原点，可以在受体细胞中自主复制 B.质粒能携带外源DNA片段进入受体细胞 C.具有一个或多个限制酶酶切位点，便于目的基因的表达 D.质粒上常有特殊的标记基因 答案以及解析 1.答案：C 解析：C对，据题意可知，限制性内切核酸酶EcoRⅠ的识别序列为，则理论上，该序列出现的概率为1/（4×4×4×4×4×4）=1/4096，即每平均4096个碱基对序列中会出现一个限制性内切核酸酶EcoRⅠ的 ... ...