第3章　第2节　第2课时　将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定（学案（含答案） 课件，2份打包）

(课件网) 第3章 基因工程 <<< 第2课时 将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定 学习目标 1.阐明将目的基因导入受体细胞的方法。 2.阐明目的基因的检测与鉴定的方法。 1.将目的基因导入受体细胞 (1)将目的基因导入植物细胞 ①花粉管通道法 a.用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入 中。 b.在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助 进入胚囊。 子房 梳理　教材新知 花粉管通道 ②农杆菌转化法 a.转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持_____ 的过程。 b.农杆菌的特点：农杆菌细胞内含有 质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的 (可转移的DNA)转移到被侵染的细胞内，并且将其整合到该细胞的 上。 c.目的基因插入 质粒的 中→导入 →整合到受体细胞的 上→表现出新性状的植株。 稳定和表达 Ti T－DNA 染色体DNA Ti T－DNA 植物细胞 染色体DNA (2)将目的基因导入动物细胞 ①方法： 技术。 ②受体细胞： 。 ③过程：目的基因表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物。 (3)将目的基因导入微生物细胞 常以大肠杆菌作为受体细胞，一般先用 处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种能 周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。 显微注射 受精卵 Ca2＋ 吸收 2.目的基因的检测与鉴定 (1)分子水平的检测 ①导入水平：通过 等技术检测受体细胞的 上是否插入了 。 ②转录水平：利用PCR等技术检测目的基因是否转录出了 。 ③翻译水平：用相应的抗体进行 检测目的基因是否翻译成蛋白质等。 (2)个体生物学水平的鉴定：抗虫、抗病接种实验等。 PCR 染色体DNA 目的基因 mRNA 抗原—抗体杂交 3.基因工程的基本操作程序 目的基因 限制酶 DNA连接酶 基因 表达载体 表达载体 检测和鉴 定 (1)为培育抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体细胞(　　) 提示　为培育抗除草剂的作物新品种，受体细胞可以是受精卵，也可以是体细胞。 (2)Ti质粒上的T－DNA可转移到植物细胞内，并且与其染色体DNA整合在一起(　　) × √ (3)常用卵细胞作为培育转基因动物的受体细胞(　　) 提示　常用受精卵作为培育转基因动物的受体细胞。 (4)检测目的基因是否成功表达可用抗原—抗体杂交技术(　　) (5)用PCR技术检测目的基因是否转录出mRNA，利用了碱基互补配对原则(　　) (6)基因工程是否成功需进行个体生物学水平的鉴定(　　) × √ √ √ 任务：分析将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定 1.在用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中，一定要将目的基因插入到Ti质粒的T－DNA(可转移的DNA)上，原因是农杆菌中的Ti质粒上的T－DNA_____ _____。 探究　核心知识 可转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上 2.基因表达载体中具备标记基因(如抗生素抗性基因)，已经对受体细胞进行了筛选，基因工程的第四步还要对目的基因进行检测和鉴定，原因是：在含抗生素的选择培养基上能生长的可能是_____ ，因此第四步需要对目的基因是否导入进行进一步的检测。此外，即便在选择培养基上能生长的细胞中导入的是基因表达载体，但是仍然不知道目的基因插入的 等是否正确，能否正确 ，因此也需要在 水平上进行检测和鉴定。 3.如果目的基因是抗虫基因，在个体水平上检测的方法是_____ ；如果目的基因是耐盐基因，在个体水平上检测的方法是_____ 。 导入了基因表达载体或未插 入目的基因的空载体 位置、方向 表达 转录和翻译以及个体 进行抗虫接种 实验 用一定浓 度的盐水浇灌 核心归纳 1.农杆菌转化法中两次拼接、两次导入的辨析 (1)两次拼接：第一次拼 ... ...