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课件网) 实验突破一 DNA的粗提取与鉴定 第3章 基因工程 <<< 一、实验原理 1.提取DNA的原理 利用DNA与 、 和脂质等在物理和化学性质方面的差异，选用适当的物理或化学方法提取DNA，去除其他成分。 如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性： 不溶于酒精，但某些 溶于酒精。 (2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于 的NaCl溶液。 2.鉴定DNA的原理 在一定温度下，DNA遇 会呈现 。 RNA 蛋白质 DNA 蛋白质 2 mol/L 二苯胺试剂 蓝色 二、实验步骤 纱布 酒精 三、操作提示 1.以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠，防止 。 2.加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧 ，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。 血液凝固 DNA分子的断裂 四、关键点拨 1.利用动物细胞提取DNA时，破碎细胞的方法：动物细胞无细胞壁，可直接使其 。 2.不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。 3.提纯DNA时，选用体积分数为95%的冷酒精的原因：体积分数为95%的冷酒精 更佳。 4.实验中进行了2次静置或离心，目的是将 和 分开，第1次操作后，DNA存在于 中；第2次操作后DNA存在于_____ 或 中。 吸水涨破 提纯效果 DNA 杂质分子 上清液 析出的白色丝 状物 离心管沉淀 例1 (2023·亳州高二期中)如图为DNA的粗提取与鉴定实验的部分操作流程。下列相关叙述正确的是 A.将图1中的研磨液过滤后保留沉淀 B.图2过程中，用玻璃棒进行交叉搅拌会使DNA析出更快 C.图2析出得到的白色丝状物只能溶于2 mol/L的NaCl溶液中 D.图3对提取后的DNA进行鉴定，两支试管中均要加入二苯胺试剂 √ 将图1中的研磨液过滤后应保留上清液，A错误； 图2过程中，用玻璃棒搅拌要轻轻搅拌且沿同一方向进行，以免加剧DNA分子的断裂，B错误； 图2析出得到的白色丝状物主要成分是DNA，DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl的浓度变化而改变的，不是只能溶于2 mol/L的NaCl溶液中，C错误。 选项 试剂 操作 作用 A 研磨液 与生物材料混合 提取溶解DNA B 2 mol/L NaCl溶液 与提取出的DNA混合 溶解DNA C 冷却的酒精 加入到离心后的上清液中 溶解DNA D 二苯胺试剂 加入到溶解有DNA的NaCl溶 液中 鉴定DNA DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理可以初步分离DNA与蛋白质，C错误。 √ 例2 如表关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述，不正确的是 1.(2023·广东，11)“DNA的粗提取与鉴定”实验的基本过程：裂解→分离→沉淀→鉴定。下列叙述错误的是 A.裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质 B.分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等 C.沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度 D.鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色 跟踪训练 1 2 3 4 5 6 √ 裂解是使细胞破裂释放出DNA等物质，针对不同的实验材料，可选择不同的方法破坏细胞，如植物细胞可选择研磨的方法，而动物细胞可选择吸水涨破的方法，A正确； DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2 mol/L的NaCl溶液，将溶液过滤，即可将混合物中的多糖、蛋白质等与DNA分离，B正确； 跟踪训练 1 2 3 4 5 6 DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理可以反复多次用酒精沉淀出DNA，提高DNA的纯度，C正确； 将DNA溶于NaCl溶液中，加入二苯胺试剂，沸水中加热五分钟，待冷却后，溶液能呈现蓝色，D错误。 跟踪训练 1 2 3 4 5 6 DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水，B正确； 向洋葱研磨液的上清液中加预冷的酒精溶液(体积分数为95%)搅拌，可见玻璃棒上有白色丝状物，D错误。 2.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是 A.酵母菌和菜花均可作为提取DNA的材料 B.DNA既溶于2 mol ... ...
