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课件网) 愿你的学习像有丝分裂一样，有序进行，收获满满! 祝你新的一年里，像线粒体一样，充满能量，活力四射! 祝你新的一年里，像种群增长一样，不断壮大，实现梦想! 愿你的2025年像群落演替一样，不断进步，走向成功! 祝你新的一年里，像自然选择一样，成为最优秀的自己! DeepSeek 2.2动物细胞工程 动物细胞培养(第一课时) 动物细胞工程常用的技术： 动物细胞培养 ———动物细胞工程的基础 动物细胞融合 动物细胞核移植 从动物体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后 在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 原理： 细胞增殖 (有丝分裂) 动物细胞培养 概 念 ： 一、动物细胞培养的条件 1.营养 (1)培养基构成： 合成培养基十血清等一些天然成分 合成培养基：将细胞所需的营养物质(糖类、氨基酸、无机盐、 维生素等)按种类和所需量严格配制的培养基。 血清等一些天然成分： 含有尚未全部研究清楚的 细胞所需的营养物质 (2)培养基类型(根据物理性质): 液体培养基(培养液) HAKATA Charcosl Stripped FBS I 血清 ② 2.无菌、无毒的环境 ( 1 ) 对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。 ( 2 ) 在无菌环境下进行操作。 另外：可根据实际情况适量添加抗生素。 (3)培养液需要定期更换： 清除代谢物，防止细胞代谢物积累 对细胞自身造成危害。 无菌 无毒 一、动物细胞培养的条件 3.温度、pH 和渗透压 与相应动物内环境的理化性质保持一致。 (1)适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以 36.5±0.5℃ 为宜； (2)适宜的pH: 多数动物细胞生存的适宜pH为 _ ; (3)适宜的渗透压：目的 维持细胞正常的形态和功能 一、动物细胞培养的条件 (2)具体操作：通常采用培养皿或松盖培养瓶。 置于含有95%空气和5% CO 的混合气体的CO 培养箱中进行培养。 O 细胞代谢所必需 CO 维持培养液的pH 4.气体环境 (1)气体组成及作用： 一、动物细胞培养的条件 一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。 (2)取材原因： 细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养 1.取动物组织 (1)取材： 、动物细胞培养的过程 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间 ②原因：成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖 一是能使细胞与培养液充分接触，保证细胞所需要的营养供应； 二是能保证细胞内有害代谢物的及时排出。 (2)用培养液将细胞制成细胞悬液。 将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内，置于适宜环境中进行原代培养。 二、动物细胞培养的过程 2.动物组织处理———制成细胞悬液 (1)将组织分散成单个细胞 ①方法：机械法 二、动物细胞培养的过程 思考1:进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞，这说明 细胞间的物质主要是什么成分 用胃蛋白酶行吗 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。 胃蛋白酶作用的适宜pH 约为2, 当pH 大于6时，胃蛋白酶就会 失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH 为7.2～7.4,胃蛋白酶 在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。 思考2:胰蛋白酶会把细胞膜蛋白分解掉吗 可能会 控制好作用时间 二、动物细胞培养的过程 3.体外培养的动物细胞类型 ① 悬 浮生长类：能够悬 浮在培养液中生长增殖。 ② 贴壁生长类： 需要贴附于某些基质表面才能生长增殖。 大多数细胞属于这种类型。 悬浮培养瓶 正常细胞 平面观 表面的要求： 光滑、无毒、 易于贴附。 二、动物细胞培养的过程 ①细胞贴壁：大多数细胞需要贴附于某些基质表面才能 增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁 上，这种现象称为细胞贴壁。 影响贴壁类细胞生长分裂的因素： 一方面会因细胞密度过大、有害代谢物积累和 培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。 另一方面还会发生接触抑制现象。 ②接触 ... ...
