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课件网) 第二节动物细胞工程 动物细胞融合技术与单克隆抗体 本节主要解决的困惑 1.动物细胞融合技术 ★ 2. 设计单克隆抗体制备的实验方案 比较项目 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 原理 细胞膜的流动性 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 细胞增殖 融合前处理 去除细胞壁 使细胞分散 诱导融合的 方法 物理(离心、振荡、电 激)化学(PEG) 物理、化学方法( PEG)、灭活的病毒 用途 杂种植株 制备单克隆抗体 意义 突破远缘杂交不亲和的障碍，打破生殖隔离 困惑点一：动物细胞融合技术 合作探究要求： 1.请对比植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术，尝试比较两者之间的异同点 2.先独立思考，然后小组合作，派代表分享，时间2min。 技术 过程 方法 原理 应用 灭活的病毒颗粒黏附于 细胞表面 病毒表面糖蛋白和细胞 膜上的糖蛋白发生作用 蛋白质、脂质分子重排， 细胞膜打开 细胞融合，形成杂交细胞 为什么植物体细胞杂交技术不能用灭活的病毒作诱导剂 点拨提升1 1、 下列关于动物细胞融合的说法，错误的是( D ) A.细胞融合前要用酶解法将组织分散成单个细胞 B.细胞融合的原理是细胞膜的流动性 C.融合后得到的杂交细胞具有两个或多个亲本细胞的遗传信息 D.融合后得到的杂交细胞具有两个细胞核 学以致用1 2. (2018江苏单科，22,3分)如图为细胞融合的示意图，下列叙述 正确的是(不定项) ( BC) A. 若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去分化再诱导融合 O )a B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现 C.c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关 D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因 ◎b )c 学以致用1 1.阅读以下资料，设计制备治疗新冠的单克隆抗体实验方案，可用简单文字和 箭头表示，完成后拍照上传，小组长上传即可。 2. 请先独立思考，然后小组合作交流，派代表展示成果，时间4min。 资料：人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多 达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异 性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即 克 隆 。 骨髓瘤细胞能无限增殖。 困惑点二：设计制备单克隆抗体的方案 合作探究要求： 获得产生抗新冠 病毒抗体的B淋 巴细胞 ( 一 筛):利用 选择培养基获得 杂交瘤细胞 腹腔中有易于培 养杂交瘤细胞的 条件 7 筛选杂交细胞 人 8 克隆能产生抗体 的阳性细胞 10 再克隆 1 注射小鼠阳性细胞 BB 、B瘤 、瘤瘤 杂交细胞 (二筛):获得能产生所 需专一抗体的杂交瘤细胞 单克隆抗体的制备过程 杂交瘤细胞 抗体检验 9 11 体外培养 培养骨髓瘤细胞 灭活新冠病毒 融合 B淋巴细胞 单克隆抗体 单克隆抗体 骨髓瘤细胞 免疫小鼠 单克隆抗体 未融合 B-B融 B-骨髓瘤 骨髓瘤-骨髓 未融合的骨 的 B细 胞 合细胞 融合细胞 瘤融合细胞 髓瘤细胞 用HAT选择培养基 将其他类型细胞淘汰，只保留 进行第一次筛选 B细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞 多孔板进行第二次筛选 性质不稳定，在培养过程中会有染色 体丢失现象，直到细胞呈现稳定状态 为止。因此在建立杂交瘤细胞系过程 给小鼠注射特定抗原的目的是获得能产生相应抗体白 中要经常检查抗体效价。 骨髓瘤细胞 物理方法 化学方法 生物方法 知识拓展：HAT 培养基原理 多种B淋巴细胞 诱导原生 质体融合 从小鼠腹 水中获取 体内培养。 不同类型的B细胞与骨髓瘤 细胞融合形成的融合细胞 只保留能产生特定抗体 的杂交瘤细胞 培养液 中获取 体外培养 杂交瘤细胞是异源四倍体细胞，遗传 能产生特定抗体 的杂交瘤细胞 图23 .5 单克隆抗体 须 知 酶解分散 第一次筛选的内容如下。 ① 诱导融合后，融合体系中有多种细胞：B 细 胞 -B 细胞形成的融 ... ...
