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课件网) 第2章 细胞工程 第2节(第一课时) 动物细胞培养 自主预习 阅读P43-44, 快速找答案 · 1)动物细胞工程的3大技术 · 2)动物细胞培养的4大条件 · 3)找几个名词：细胞贴壁、接触抑制、 原代培养、传代培养 动物细胞工程的基础 动物细胞工程常用三大技术 动物细胞核移植 克隆猴：中中和华华 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 克隆皮肤 从社会中来 皮肤的自体移植 小面积烧伤：患者通过切除+植皮(自身)后恢复。 大面积烧伤 患者自身的不够用，如何解决 >使用他人皮肤如何 >培养自身细胞 目前，科学家还在研究 对皮肤干细胞进行培养， 以获得适合临床上使用 的人造皮肤。 通过细胞培养构建的 人造皮肤 PART 01 动物细胞培养的条件 1.概念 取动物组织，将它分散成单个细胞，在适宜条件生长和增 殖的技术。 2.原理 细胞增殖(有丝分裂) 3. 目的 获得细胞或者细胞产物 幼龄或幼龁动物能细胞/hy 4.培养对象选择 幼龄个体细胞分化程度低、分裂能力强 一、动物细胞培养的条件 动物细胞培养 一、动物细胞培养的条件 动物细胞培养 5.培养条件 无菌、无毒的环境 适宜温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 糖类 氨基酸 无机盐 维生素 动物细胞 培养基本 条件 营养 条件 其他 条件 一、动物细胞培养的条件 动物细胞培养 营养 直接用合成然培养基吗 Why 合成培养基+血清等天然成分 增殖所必需的物质，满 足细胞对未知营养成分 的 需 求。 物质按种类和所需 量严格配制而成的 培养基。 将细胞所需的营养 含人类未知、细胞生长 一 般 使 用液体培养基 也 称培养液。 血清等天然成分 合成培养基 ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 ②在无菌环境下进行操作 ③添加一定量的抗 生 素 → 防止微生物污染 定期更换培养液 目 的 ：清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细 胞自身造成危害。 无菌、无毒的环境 如何维持无菌、无毒的环境 一、动物细胞培养的条件 动物细胞培养 无毒 无菌 95% 空 气(细胞代谢必需)和 5 %CO ( 维 持pH) 培养皿或松盖培养瓶置于CO 培养箱。 气体环境 分别有什么作用 使用什么装置 ( 36.5±0.5)℃;pH7.2-7.4; 适宜的渗透压 温度、pH、 渗透压 一、动物细胞培养的条件 气体环境 动物细胞培养 松盖培养瓶 液体培养基 CO 培养箱 PART 02 动物细胞培养的过程 二、动物细胞培养的过程 阅读P44-45,思考并回答下列问题： 1.动物细胞培养过程为什么将组织分散成单个细胞呢 可用什么方法 2.体外培养动物细胞有哪些类型 3.什么是细胞贴壁 什么是接触抑制 4.什么是原代培养和传代培养 5.为什么要进行分瓶培养 怎么处理 6.动物细胞培养与植物组织培养有什么异同 自主预习 二、动物细胞培养的过程 1.取动物组织 取材对象： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。 取材原因： 细胞分化程度低，增殖能力强。 2.分散成单个细胞 ①从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖。 ②利于细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。 原 因 ： 二、动物细胞培养的过程 2.分散成单个细胞 方法： 机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间 ①说明动物细胞间的物质主要是什么成分 蛋白质 ②用胃蛋白酶可以吗 不可以，因为胃蛋白酶的最适PH为1.5左右 ③胰蛋白酶处理时间过长，会怎样 细胞膜也含蛋白质，长时间会分解细胞膜蛋白，破坏细胞结 构，把细胞消化掉。注意控制时间和酶用量。 3.制备细胞悬液 用培养液将细胞制成细胞悬液。 二、动物细胞培养的过程 4.原代培养 细胞贴壁过程 放入CO 培 羊筘中+立羊 思考：细胞培养一段时间，分裂会受阻，这是为什么 怎样解决这一问题 厂 具 浮生 上 米 · △ 田 细 响宓 度 过 + 方 宇 代 物 和 男和 + 立 羊 液 巾 ... ...
