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课件网) 四 mmngm 第一章发酵工程 第2节 微生物的培养技术及应用 人教版 ·选择性必修3 问题探究 纯培养 配制培养基 灭菌 具 接种 几 分离 具 培养 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中 分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的 微生物在混合的菌群中不是优势种群时，仅通过一般 的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办 由单一个体繁殖 所获得的微生物 群体 。 > 如何从自然界中分离出需要的特定微生物 纯培养物 聚合酶链式反应(PCR) 是一种在体外扩增DNA 片段的技术， 此项技术要求使用耐高温的DNA 聚合酶。1973年，科学家布鲁克 从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌(Taq 细 菌 ) , 进 而提取出耐高温的DNA 聚合酶(Taq 酶 ) 。这种酶目前已被广泛用 于聚合酶链式反应(PCR)。 > 讨论： 1.筛选水生栖热菌的思路是什么样的 耐高温的酶寻我→ 耐高温生物体 寻找 高温环境(热泉、火山口) 2.为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢 这是因为水生栖热菌能在70-80℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 问题探究 美国黄石公园 启示：寻找目的菌种时要根据它对 生存环境 的要求，到相应的环境中去寻找。 1.在被石油污染的土壤中可以筛选_分解石油 微生物。 2.在冰川冻土层可以筛选 耐 寒 微生物。 3.以纤维素为唯一碳源培养基_ 纤维素分解菌 o 实验室筛选微生物原理：人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和 pH) 等，同时抑制或阻止其他微生物生长。 选择培养基应运而生。 一、选择培养基 (1) 原 理 ：人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH 等),同时抑制或阻止其他微 生物的生长。 ( 2 ) 概 念 ：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长 的培养基，称为选择培养基。 ( 3 ) 实 例 ： > 70~80℃的高温 ——— 分离耐热菌 改变培养条件 > 不加碳源的培养基 — → 分离出自养微生物 营养缺陷 > 不加氮源的培养基 ——— 分离固氮微生物 > 加青霉素的培养基 — → 分离真菌(青霉素能杀死细菌、放线菌) 添加某种化 学物质 > 加高浓度食盐 — → 分离金黄色葡萄球菌 > 加石油为唯一碳源 — → 分离出分解石油的分解菌 特殊碳、氮源 一、选择培养基 培养基 培养基+氨苄青霉素 培养基中加氨苄青霉素 没有抗氨苄青霉素 能力的菌落被淘汰 具有抗氨苄 青霉素能力 的细菌 问题：怎么证明一个选择培养基具有选择性呢 选择培养基 怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌 一、选择培养基 没有氨苄 青霉素抗 性的细菌 能够生长 思考讨论： 怎么证明一个选择培养基具有选择性呢 应该设置基础培养基(如牛肉膏蛋白胨培养基)或完全培养基作为对照，若 基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基，则该选择培养基 具有选择性。 基础培养基 选择培养基 问题：如果让你配制一种培养基，让土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出 来，培养基的配方该如何设计 一、选择培养基 > 思考 · 讨论：选择培养基配方的设计 尿素[CO(NH ) ] 含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中 一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH , NH 再转化成NO 、NH + 等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素， 是因为它们能合成脲酶 ，脲酶催化尿素分解产生NH ,NH 可作为细菌生 长的氮源。 > 怎样才能将分解尿素的细菌从土壤中分离出来 尿 素 设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。 > 该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点 这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。 一、选择培养 ... ...
