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课件网) 第二章 第2节 动物细胞工程 第2课时：动物细胞融合技术与单克隆抗体 去壁 去壁 融 合 再生 新壁 脱分化 再分化 移栽 植物细胞融合技术 植物组织培养技术 A细胞 A原生质体 B细胞 B原生质体 正在融合的原生质体 再生出细胞壁 愈伤组织 杂种植株 细胞膜的流动性 植物细胞的全能性 知识回顾 动物细胞融合技术 一 情境一 人乳头状瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生。如图是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程 单克隆抗体制备运用动物细胞融合技术，阅读教材48页，回答以下问题 A 小鼠 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 杂交髓瘤细胞Ⅰ 融合 筛选① 筛选② 杂交髓瘤细胞Ⅱ 扩大培养 单克隆抗体 (1)概念： 使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 (2)结果： 形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。 (3)原理： 细胞膜具有一定的流动性 (4)诱导融合的常用方法： PEG融合法 电融合法 灭活病毒诱导法 动物细胞融合 细胞膜的流动性 细胞增殖 动物细胞培养 从以下方面阐明动物细胞融合技术 【任务1】 仙台病毒 紫外线 灭活 丧失感染活性（不感染细胞） 保留融合活性（诱导细胞融合） 1.什么是病毒的灭活？ 灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。 诱导融合的常用方法 相关信息 病毒表面的糖蛋白和一些酶与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 2.灭活病毒诱导细胞融合的原理 诱导融合的常用方法 相关信息 (5)意义： 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 (6)应用： ①细胞融合技术已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。 ②利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 从以下方面阐明动物细胞融合技术 【任务1】 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞融合前的处理方法 诱导细胞融合的方法 细胞融合成功的标志 主要用途 意义 细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性 细胞膜具有一定的流动性 用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞 电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法 PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法 再生出细胞壁 细胞核的融合 获得完整的杂种植株 主要用于制造单克隆抗体 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 动物细胞融合技术与植物体细胞杂交的比较 【任务2】 1.与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合的原理及其特有的诱导方法分别是( ) A.细胞膜的流动性、离心 B.细胞膜的流动性、灭活病毒诱导法 C.细胞的全能性、电融合法 D.细胞的全能性、灭活病毒诱导法 课堂检测 B 2.下列关于动物细胞融合技术的叙述，错误的是( ) A.细胞融合技术能应用于细胞遗传、细胞免疫等研究 B.动物细胞融合的成功是细胞膜具有流动性的有力证据 C.动物细胞融合的基本原理与植物原生质体融合的基本原理不同 D.除了化学法和物理法外，动物细胞融合还可以由灭活病毒诱导 课堂检测 C 3.如图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是( ) A.若a细胞和b细胞是植物细胞，需先脱分化再诱导融合 B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现 C.c细胞的形成与a、b细胞的全能性有关 D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因 课堂检测 B 单克隆抗体的制备 二 图中向小鼠注射的A是_____,为产生 ,传统产生抗体的方法是反复给小鼠注射A，然后从血清中分离所需抗体，用这种方法生产抗体的缺点是____ ... ...
