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课件网) 课时规范练60 基因工程的基本工具与操作程序 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 必备知识基础练 考点一 重组DNA技术的基本工具 1.(2025·山西吕梁开学模拟)DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶。下列相关叙述正确的是( ) A.所有的限制酶都具有专一性,不同限制酶切割产生的黏性末端都不同 B.限制酶和DNA连接酶分别能催化磷酸二酯键的断裂和形成 C.限制酶识别序列越短,则相应酶切位点在DNA中出现的概率越小 D.DNA连接酶可以将游离的单个脱氧核苷酸连接成双链结构 B 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 解析 所有的限制酶都具有专一性,不同限制酶切割产生的黏性末端可能相同,A项错误;限制酶能够识别特定的DNA序列并催化磷酸二酯键的断裂,而DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,将DNA片段连接起来,B项正确;限制酶识别序列越短,则相应酶切位点在DNA中出现的概率越大,因为短序列在DNA中出现的频率较高,C项错误;DNA连接酶的功能是将DNA片段连接起来,而不是将游离的单个脱氧核苷酸连接成双链结构,D项错误。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 2.(2025·四川绵阳模拟)下图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息,将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列叙述错误的是( ) pBR322质粒 人生长激素基因 注:AmpR:氨苄青霉素抗性基因;TetR:四环素抗性基因。 A.用含氨苄青霉素的培养基筛选出的是含重组质粒的受体菌 B.应选择的限制酶组合是酶F和酶G C.pBR322质粒含有的AmpR基因和TetR基因都属于标记基因 D.同时用三种限制酶处理图中质粒,完全反应后可得到4种长度DNA A 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 解析 酶E会破坏两种标记基因,为避免切割后DNA片段的自身环化,又保留质粒上的标记基因,切割时应选择的限制酶组合是酶F和酶G,由于酶F会破坏四环素抗性基因,故使用含氨苄青霉素的培养基筛选出的是导入重组质粒的受体菌和导入原质粒的受体菌,A项错误,B项正确;pBR322质粒含有的AmpR基因和TetR基因都属于标记基因,以便于对含有目的基因的受体菌进行选择,C项正确;据图可知,同时用三种限制酶处理图中质粒,因酶E有两个作用位点,故同时用三种限制酶处理图中质粒,完全反应后可得到4种长度DNA,D项正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 3.(2025·北京西城开学模拟)用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性内切核酸酶分别处理同一DNA片段,酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是( ) 图1 酶切位点图 图2 电泳结果示意图 A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同 B.图2中酶切产物可用于构建重组DNA C.泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物 D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA D 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 解析 酶具有专一性,不同的限制酶识别并切割不同的核苷酸序列,故图1中两种酶识别的核苷酸序列不同,A项正确;重组DNA通常是连接两个不同的DNA片段,故图2中酶切产物可用于构建重组DNA,B项正确;分析图1,限制酶SalⅠ有三处切割位点,切割后产生4个DNA片段,泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物,C项正确;图中限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,图中被酶切的DNA片段是双链DNA,D项错误。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 4.(2023·湖北卷)用氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、四环素抗性基因(TetR)作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒,构建基因表达载体(重组质粒),并转化到受体菌中。下列叙述错误的是( ) A.若用HindⅢ酶切,目的基因转录的产物可能不同 B.若用PvuⅠ酶切,在含Tet(四环素)培养基中的菌落,不 ... ...
