菊花的组织培养 一、植物组织培养的基本过程 1．理论基础：植物细胞的全能性。 2．细胞分化：在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 3．基本过程 (1)愈伤组织：由离体的植物组织或细胞经脱分化形成的一团排列疏松而无规则、高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 (2)脱分化：又叫去分化，是由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 (3)再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成根或芽等器官的过程。 二、影响植物组织培养的因素 1．植物材料 (1)不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。 (2)同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 2．营养物质 (1)大量元素，如N、P、K、Ca、Mg、S。 (2)微量元素，如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co。 (3)有机物，如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素，以及蔗糖等。 3．植物激素：生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，二者的浓度、使用的顺序及用量的比例等都会影响实验结果。 4．环境条件：如pH、温度、光照等，进行菊花的组织培养一般将pH控制在5.8左右，温度控制在18～22 ℃，并且每日用日光灯照射12 h。 三、菊花组织培养的实验操作 →→→→→ 1．制备MS固体培养基： 配制各种母液―→配制培养基―→灭菌。 2．外植体消毒：取菊花嫩枝―→流水冲洗―→加洗衣粉刷洗―→流水冲洗20 min吸干,体积分数为70%的酒精消毒6～7 s―→无菌水清洗质量分数为0.1%的氯化汞溶液消毒1～2 min―→无菌水清洗(至少3次)。 3．接种：菊花茎段插入培养基时注意方向，不要倒插。每瓶接种6～8块外植体。 4．培养：最好放在无菌箱中培养，并定期消毒。培养温度控制在18～22_℃，并且每日用日光灯照射12_h。 5．移栽：移栽前应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日。然后用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。 6．栽培：将幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花。 1．植物学家将胡萝卜根的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入特定的培养基中培养，获得了许多完整的植株。此过程依据的原理和技术是( ) A．细胞的分裂和细胞工程 B．细胞的分化和基因工程 C．细胞的全能性和组织培养 D．花药离体培养和单倍体育种 解析：选C 由单个细胞到完整植株，依据的原理是植物细胞的全能性，该过程是植物组织培养。 2．在植物组织培养过程中，愈伤组织的形成和形态的发生是十分关键的。这除需要必备的营养和一些刺激因素外，还需要有诱导作用的物质，它们是( ) A．铜、锌等微量元素 B．细胞分裂素和生长素 C．蔗糖和葡萄糖 D．维生素和氨基酸 解析：选B 愈伤组织的形成除了必备的营养和一些刺激因素外，还需加入植物激素，如细胞分裂素和生长素等，用以调节细胞分裂和分化。 3．当先使用细胞分裂素后使用生长素时，实验结果是( ) A．有利于细胞分裂，但细胞不分化 B．细胞既分裂又分化 C．分化频率提高 D．有利于细胞分化，但细胞不分裂 解析：选B 细胞分裂素和生长素的使用顺序不同，培养的结果不同。先使用生长素后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化；两者同时使用，细胞分化频率提高。 4．菊花的组织培养需要严格的无菌操作，下列说法错误的是( ) A．培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 B．幼苗要先移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间 C．用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，一旦感染杂菌则前功尽弃 D．将菊花茎段插入时应注 ... ...
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