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课件网) * * * * * * C * C B * * * * * * * C * C * 1. * 2. * * B * * * * * * * * * * D * * * B * * * C * * * * * * * * C * A * * * * * B * B * * * * * * * * * * * * 返回 广21世纪数痘 27世纪数育 www. 1.既念的理解 基因工程别名 基因拼接技术或 技术 操作环境 生物体 操作对象 操作水平 DNA水平 2.原理： 3.优点 (1)克服 (2) 4.操作工具 (1)限制性核酸内切酶，简称 (2) (3)运载工具是 ,最常用的是 分布：主要存在于微生物中 作用与特性：一种限制性内切酶 只能识别一种特定 基因的剪刀 的核苷酸序列，并在 (限制性核酸内切酶) 特定的切点切割DNA 分子 作用结果：产生黏性末端（碱基能 互补配对) 连接部位：不同DNA分子的两个相 基因的针线 同的黏性末端 (DNA连接酶) 连接方式：通过形成3,5一磷酸二 酯键将黏性末端连接起来 作用：①作为运载工具将目的基因 转移到宿主细胞中去 ②利用它在宿主细胞内对目 的基因进行大量的复制 具备的条件：①能够在宿主细胞中 基因的运载工具 复制并稳定保存：②具备多个 (运载体) 限制酶切点，以便与外源基 因连接；③具有某些标记基因 便于进行筛选 常见的载体：质粒、噬菌体和动植 物病毒等 1.限制性内切酶和DNA连接酶的作用部位都是脱氧核苷酸之间 形成的磷酸二酯键（不是氢键），只是一个切开，一个连接。 2.质粒是最常用的运载体，不要把质粒同运载体等同，除此之 外，噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。运载体的化学本 质为DNA,其基本单位为脱氧核苷酸 3.要想从DNA上切下某个基因，应切2个切口，产生4个黏性 末端 4.基因工程中工具酶有两种 一限制性内切酶和DNA连接 酶；工具有三种，除上述两种工具酶外还包括运载体。 5.DNA酶即DNA水解酶，是将DNA水解的酶；DNA聚合酶 是在DNA复制过程中，催化形成新DNA分子的酶，是将单 个游离的脱氧核苷酸加到DNA片段上，需要模板；但DNA 连接酶是将两个DNA片段的两个缺口同时连接，不需要模 板，两者作用的化学键相同，都是磷酸二酯键 1.(2007年全国Ⅲ，4)下列有关基因工程中限制性内切酶的带 述，错误的是 A.一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B.限制性内切酶的活性受温度影响 C.限制性内切酶能识别和切割RA D.限制性内切酶可从原核生物中提取
