
中小学教育资源及组卷应用平台 2025人教版高中生物学选择性必修3 专题强化练 PCR技术 1.(2024河北沧州月考)引物在极大程度上决定了PCR的成败,下列关于引物的说法不正确的是( ) A.PCR和生物体内的DNA合成都需要引物,PCR引物一般是单链DNA B.若引物的CG碱基含量相对较高,PCR复性步骤的温度需要适当升高 C.在PCR的复性步骤,两种引物分别结合在模板链的3'端和5'端 D.若初始有10个胰岛素基因,PCR中进行10轮循环,至少需要20 460个引物分子 2.(2023北京朝阳一模)PCR除用于扩增目的基因外,还可以在目的基因两端添加合适的限制酶识别序列,下列叙述正确的是( ) A.该图表示PCR循环中的变性环节 B.若要在扩增产物两端加上特定的限制酶识别序列,则可在引物的3'端设计添加 C.Taq DNA聚合酶催化相邻的两个游离脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键 D.用图中引物扩增两个循环后即可获得添加了限制酶识别序列的产物 3.(2024江西南昌期中)荧光定量PCR是通过在PCR体系中添加荧光染料来记录PCR产物的累积情况,从而达到对PCR过程进行实时监控的目的。Ct值表示每个反应管内荧光信号达到设定的荧光阈值时所经历的循环数。通常情况下将已知浓度的DNA标准样品经过梯度稀释后分别取样进行荧光定量PCR,得到一系列的Ct值,以梯度稀释后的浓度对数值作为横坐标,浓度所对应的Ct值为纵坐标绘制曲线,即可得到一个标准曲线,如图所示,下列叙述错误的是( ) A.荧光定量PCR反应体系中需要添加耐高温的DNA聚合酶 B.荧光定量PCR可以用于检测样品中待测病毒核酸的浓度 C.若两组样品中待测病毒核酸的浓度差了10倍,则两组Ct值的差异在3与4之间 D.若标准样品的DNA出现降解,则利用所得的标准曲线分析,待测样品所测Ct值偏低 4.(2024山东日照期末)为获得转G3-GFP融合基因纯合小鼠,科研人员将绿色荧光蛋白(GFP)基因和G3基因拼接到一起(如图1),然后导入小鼠受精卵,再通过PCR和琼脂糖凝胶电泳检测了新生小鼠的基因型(如图2)。下列说法错误的是( ) 图1 图2 A.基因表达时图1中基因的启动子区和编码区均能转录 B.拼接GFP基因和G3基因时需要限制酶和DNA连接酶 C.由图可知,PCR检测时选择的引物是引物1和引物3 D.图2中的小鼠乙是转入G3-GFP融合基因的纯合小鼠 5.(2024河南信阳期末)易错PCR是利用低保真的Taq酶和改变PCR的反应条件,降低DNA复制的准确性,在新DNA链的合成过程中增加碱基错配,从而使扩增产物出现较多点突变的一种体外诱导DNA序列变异的方法。从自然界中的生物体内分离得到的天然酶,在工业生产环境中催化效率往往较低。下图是研究人员利用易错PCR技术对某种天然酶进行改造,获得了高催化效率的酶的流程示意图。回答下列问题: (1)在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解聚为单链的条件是 。PCR反应体系中需添加引物,引物的作用是 。 (2)图中步骤①为易错PCR过程,其扩增过程中需要加入Taq酶,这是因为Taq酶具有 的特点。图中步骤②是将构建的重组质粒溶于缓冲液中与用 处理的受体菌混合,在一定温度下完成转化。转化是指 。步骤③采用 技术筛选突变酶;步骤④将一轮易错PCR筛选获得的有益突变继续进行新一轮的易错PCR,通过连续易错PCR和筛选,导致酶的 进化,以获得满足人们需求的产物。 (3)Taq酶的某一区域负责将碱基与模板链正确地互补配对,Mn2+可以降低这一功能;非互补的碱基对由于氢键不易形成,稳定性差,Mg2+可以提高该错配区的稳定性。因此,与普通PCR相比,易错PCR的反应体系中应适当 (填“提高”或“降低”)Mn2+浓度、 (填“提 ... ...
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