苏教版（2019）高中生物选择性必修三 1.2 发酵工程的无菌技术课件(共85张PPT)

(课件网) 第二节 发酵工程的无菌技术 第一章 发酵工程 积极思维：肉汤腐败与微生物有什么关系？ 19世纪中期以前，人们普遍相信生命现象是自然发生的。19世纪60年代，法国科学家巴斯德通过实验证明了微生物不是自然发生的。 煮沸肉汤，杀灭其中的细菌 肉汤仍澄清，没有细菌繁殖 打断瓶颈 肉汤变混浊，细菌在肉汤中繁殖 日常生活中，我们会用碘伏消毒液擦拭受伤破损的皮肤，从而杀灭伤口部位的部分微生物。那么，在发酵工程实践中无菌操作是如何开展的呢？ 巴斯德在实验 一、发酵工程的灭菌方法和灭菌设备 1、无菌技术： 2、无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。 注： 获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染； 是指在操作过程中，保持物品与操作区域无菌的状态并不被微生物污染的技术，其核心是灭菌； ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒； ②用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌； ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行； ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触； （1）消毒 ①概念： ②常用的消毒方法 a、煮沸消毒法：100℃煮沸5～6min，可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。 b、巴氏消毒法： 62～65℃下消毒30min或80～90℃处理30s～1min，适合一些不耐高温的液体，如牛奶。可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且不破坏牛奶的营养成分。 指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。 c、化学药剂消毒法：用70%酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。 思考：利用酒精消毒时，酒精浓度是不是越高越好？ 析：高浓度酒精能将细菌表面的蛋白质凝固，并形成一层保护膜，阻止酒精进入细菌体内，因而不能将细菌彻底杀死。酒精浓度低于70%，虽可进入细菌体内，但不能将细菌彻底杀死。 ④紫外线消毒法：接种室、接种箱或超净工作台在使用前可用紫外线照射30min。在照射前，适量喷洒石碳酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。 （2）灭菌 附：芽孢和孢子的相关知识 芽孢：有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。 孢子：细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖作用的无性生殖细胞。能直接发育成新个体。 ①概念： 指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 ②常用灭菌的方法： a、干热灭菌法 耐高温，需保持干燥的物品，适用于 玻璃器皿 (如试管、培养皿、移液管、注射器)、金属器具 (如针头、 镊子、剪刀等)的灭菌； 器具： 电热鼓风干燥箱（干热灭菌箱）； 条件： 140~160℃下加热2~3h； 原理： 使微生物细胞质膜破坏、蛋白质变性和原生质干燥等； 对象： 使灭菌器皿保持干燥； 带有胶皮或塑料的物品、液体及固体培养基一般不能采用电热鼓风干燥箱干热灭菌； 优点： 缺点: 电热鼓风干燥箱： 采用电热鼓风干燥箱干热灭菌时，一般以能否杀死细菌的芽孢作为彻底灭菌的标准。 b、灼烧灭菌法 接种工具如接种环、接种针，以及接种过程中的试管口或瓶口等易被污染部位； 器具： 酒精灯； 条件： 酒精灯外焰灼烧； 效果： 最彻底； 原理： 使微生物燃烧； 对象： c、湿热灭菌法：高压蒸汽灭菌 器具： 高压蒸汽灭菌锅 条件： 100kPa、121 ℃下维持15-20min； 原理： 高温蒸汽破坏蛋白质、核酸等结构使其变性； 培养基、多种器材、物品等； 优点： 操作简便，效果可靠，可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体。基本保持培养基的营养成 ... ...