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课件网) 第二章细胞工程 第2节 动物细胞融合技术和单克隆抗体 【本节聚焦】 1.什么是动物细胞融合技术 2.单克隆抗体是如何制备的 在临 床上有哪些应用 植物细胞融合 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物体细胞杂交技术可以跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，培育出 新的作物类型。那么,有没有技术让不同种动物的体细胞进行杂交， 培育 出集不同细胞的优势于一身的动物细胞呢 植物 原生 细胞A 质体A 去壁 ① 植物 原生 细胞B 质体B 去壁 ① 融合的 原生质(AB) 杂种 细胞(AB) 脱分化 ④ 再生 新壁 ③ 融 合 ， ② 杂种植物 再分化 移栽 小鼠细胞 细胞融合 37℃ 40 min 人细胞 正在融合的细胞 融合细胞 ▲ 图 3-4 荧光标记的小鼠细胞和人细胞融合实验示意图 以前学习：这一实验以及相关的其他实验证据表明，细胞膜具有流动性。 现在学习：什么是细胞融合 人细胞和小鼠细胞如何融合在一起的呢 知识回顾：必修一第三章第1节 绿色荧光 染料标记 的膜蛋白 红色荧光 染料标记 的膜蛋白 结果 方法 P48-3 意义 P48 - 4 形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞遗传信息的。 物理法：电 融 合法 与植物原生质体融合的方法相同 化学法：聚乙二醇(PEG) 生物法：灭活病毒诱导法———动物细胞融合特有 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交(种间、属间、科间、 动植物之间)成为可能。 一 .动物细胞融合技术 1.概念 P48-2 动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个 细胞的技术。 原理 细胞膜具有一定的流动性 一 .动物细胞融合技术 拓展：生物法-灭活病毒诱导法 P48 -相关信息 (1)灭活：指用物理或化学手段使病毒失去感染能力(不感染细 胞 ) , 但 是并不破坏病毒的抗原结构( 诱 导 细 胞 融 合 )。 (2)灭活病毒诱导细胞融合的原理：细胞膜具有一定的流动性。 病毒表面含有的糖蛋白和 一些酶能够与细胞膜上的糖 蛋白发生作用，使细胞互相 凝聚，细胞膜上的蛋白质分 子和脂质分子重新排布，细 胞膜打开，细胞发生融合。 病毒黏附使细胞凝聚 膜打开 膜融合 细胞质融合 细胞核融合 (3)融合实质及完成的标志：细 胞 核的 融 合 一 .动物细胞融合技术 [旁栏思考]19世纪30年代，科学家曾在肺结核、天花和麻疹等疾病 的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象 病人体内病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。 2、不灭活的病毒能否作为诱导剂 不能。用病毒作为诱导剂时，必须事先灭活， 使病毒失去感染和增殖能力，但不破坏病毒的 抗原结构。而不灭活的病毒会感染细胞，不能 诱导细胞融合。 杂交细胞 一 .动物细胞融合技术 【思考讨论】 1、 动物细胞完成融合实质及完成的标志是什么 当两个细胞核融合后形成具有单核的杂交 细胞，标志动物细胞融合完成。 A细胞 人工诱导 B细胞 一 .动物细胞融合技术 2.应用 P48-D1 ①至今，种间、属间、科间，甚至动物和植物之间细胞融合都已获得成功。 资料：2016年，《ACS Synthetic Biology》杂志上报道一个日本科学家 团队，他们将拟南芥细胞与人类HT1080细胞融合，杂交细胞中产生出了人 类/植物融合染色体，同时还能稳定存活、增殖，进行基因表达的案例。 ②研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育 生物新品种等的重要手段。 ③为制造单克隆抗体开辟了新途径。 比较 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞膜的流动性 细胞的全能性 细胞膜的流动性 步骤 酶解法去掉_细胞壁后，诱导原生质体融 合 ， 形成_杂种细胞，再经植物组织培养形 成_杂种植株。 分散成_单个细胞后诱导细胞融合， 形成_杂 交 细 胞 。 方法 聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca +—高pH融 合法、电融合法、离心法 PEG融合法、电融合法、 灭活病毒诱导法 结果 形成_杂 ... ...
