选择性必修3　第九单元　第55讲　重组DNA技术的基本工具（课件 学案 练习，共3份）2026届高考生物学（通用版）一轮复习

(课件网) 第55讲　重组DNA技术的基本工具 选择性必修3　生物技术与工程 第九单元　生物技术与工程 1．阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具。　 2．实验：DNA的粗提取与鉴定。 一、基因工程的概念 考点1　重组DNA技术的基本工具 DNA分子 转基因 遗传特性 生物类型 基因重组 二、基因工程的诞生和发展 1．肺炎链球菌转化实验不仅证明了遗传物质是DNA，还证明了DNA可在同种生物不同个体之间____。 2．DNA双螺旋结构的提出和_____的证明。 3．中心法则的确立。 4．_____的破译。 转移 半保留复制 遗传密码 5．基因转移载体的发现。_____的发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。 6．_____体外重组的实现。 7．重组DNA表达实验的成功。 8．DNA测序和合成技术的发明。 9．_____技术的发明。 10．_____技术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换。 限制酶、DNA连接酶和逆转录酶 DNA PCR 基因组编辑 三、重组DNA技术的基本工具 1．限制性内切核酸酶(也称“限制酶”) 原核生物 特定核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 1．(人教版选择性必修3 P71旁栏思考)存在于原核生物中的限制酶的作用是_____ _____。 提示：切割外源DNA以保证自身安全，防止外来病原体的危害 2．(人教版选择性必修3 P71正文)用两种不同的限制酶切割目的基因的优点是_____ _____。 提示：防止质粒和目的基因的自我环化及质粒和目的基因的反向连接 2．DNA连接酶 磷酸二酯键 大肠杆菌 黏性末端和平末端 3．载体 噬菌体 一个至多个 自我复制 受体DNA 标记 3．(人教版选择性必修3 P72旁栏思考)DNA连接酶和DNA聚合酶的作用不相同，主要区别在于_____ _____ _____ _____。 提示：DNA连接酶连接的是两个DNA片段，而DNA聚合酶是将单个的脱氧核苷酸连接到脱氧核苷酸链上 4．(人教版选择性必修3 P73正文)实践中常用某些病毒载体作为基因工程工具，除具备普通“质粒载体”的条件外，还应具有的条件是_____。 提示：对靶细胞具有较高的转化效率；不能增殖，对细胞无害 限制酶的选择要求 1．位置要求：限制酶的酶切位点不能位于启动子、终止子、复制原点、标记基因当中，所选酶切位点应位于启动子和终止子之间，若载体有多个标记基因，并非都不能破坏，要至少保留一个，用于重组DNA的鉴定和筛选。另外，目的基因上如果有该酶的酶切位点，不能选择。 [深化拓展] 2．酶切要求 (1)单酶切：为使目的基因与载体形成的DNA片段末端能够连接，通常使用同一种限制酶将两者切割(如下图，选用XhoⅠ)，但单酶切会出现目的基因与质粒的自身环化和随意连接，还可造成目的基因的多拷贝插入。 (2)双酶切：双酶切可以确保目的基因的正确插入，要求两个酶切位点位于目的基因的两侧，如下图可选择PstⅠ和BamHⅠ，但也要注意酶切位点个数和相对位置，如：不能选择XhoⅠ和BamHⅠ进行双酶切。另外，不同的限制酶所产生的末端相同，两端也可连接，因MunⅠ和EcoRⅠ酶切后产生的末端相同，可选择XhoⅠ和MunⅠ酶切目的基因，用XhoⅠ和EcoRⅠ酶切质粒。 3．数量要求：如果所选限制酶的切割位点不止一个，如选择SmaⅠ进行酶切，则切割重组后会丢失复制原点，那么载体进入受体细胞后不能自主复制，所选限制酶在载体上最好只有一个酶切位点。 4．特殊要求：例如根据Ti质粒的T-DNA片段选择限制酶，假设切割目的基因的限制酶为XbaⅠ和SacⅠ，则甲、乙、丁质粒均不宜选取，丙质粒宜选取。 1．基因工程的原理是基因重组，此变异是不定向的。 (　　) 提示：此变异是定向的。 2．DNA连接酶“缝合”目的基因与载体之间的氢键。 (　　) 提示：DNA连接酶将两个DNA片段连接形成磷酸二酯键。 × × 3．限制 ... ...