选择性必修3　第九单元　第56讲　基因工程的基本操作程序（课件 学案 练习，共3份）2026届高考生物学（通用版）一轮复习

(课件网) 第56讲　基因工程的基本操作程序 选择性必修3　生物技术与工程 第九单元　生物技术与工程 1．阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定等步骤。　 2．实验：利用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段并完成电泳鉴定，或运用软件进行虚拟PCR实验。 一、目的基因的筛选与获取 1．筛选合适的目的基因 (1)目的基因：在基因工程的设计和操作中，用于改变_____或获得_____等的基因。主要是指_____的基因。 (2)筛选目的基因的方法：从相关的已知_____清晰的基因中进行筛选是较为有效的方法之一。 考点1　基因工程的基本操作程序 受体细胞性状 预期表达产物 编码蛋白质 结构和功能 2．利用PCR获取和扩增目的基因 (1)原理：DNA半保留复制。 (2)条件 ①一定的缓冲液、DNA模板、_____、4种脱氧核苷酸和_____。 ②通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。 2种引物 耐高温的DNA聚合酶 (3)过程 (4)PCR产物的鉴定：常采用_____来鉴定。 琼脂糖凝胶电泳 50 ℃ 72 ℃ 1．(人教版选择性必修3 P78图3-5)PCR反应体系中需要同时加入两种引物的原因是_____ _____ _____。 提示：DNA聚合酶只能从引物的3′端延伸DNA链，且DNA两条单链的序列不同，用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增 二、基因表达载体的构建———基因工程的核心 1．构建基因表达载体的目的 (1)使目的基因在受体细胞中_____，并且可以遗传给下一代。 (2)使目的基因能够____和发挥作用。 稳定存在 表达 2．基因表达载体的组成 RNA聚合酶 转录 3．基因表达载体的构建过程 三、将目的基因导入受体细胞 花粉管通道 T-DNA 染色 体DNA 显微注射 受精卵 Ca2+ 四、目的基因的检测与鉴定 染色 体DNA 目的基因 mRNA 抗原—抗体 2．(人教版选择性必修3 P82正文)转基因抗虫棉培育过程中，检测目的基因是否成功表达的常见方法有_____、_____。 提示：抗原—抗体杂交　采摘抗虫棉的叶片饲喂棉铃虫 筛选含有重组质粒的受体细胞的方法 1．用“影印法”筛选含有重组质粒的受体细胞 (1)将混合处理后的细菌先放在含氨苄青霉素的培养基上培养，能生长的是含重组质粒的细菌和含自身环化质粒的细菌，如图1、2、3、4、5菌落。 [深化拓展] (2)再利用无菌的绒布影印到含有四环素的培养基上，如图能生长的菌落为2、3、4，则在含四环素培养基上不生长的即为含有目的基因的菌落，如图1、5菌落。 (3)最后，可在含氨苄青霉素的培养基上挑取1、5菌落进行培养。 2．用“蓝白斑”筛选含重组质粒的受体细胞 大肠杆菌产生的β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal切割成半乳糖和深蓝色的物质，在经人工插入外源基因后，大肠杆菌的β-半乳糖苷酶基因被插入的外源基因切断，无法形成完整的β-半乳糖苷酶，故不能对无色化合物X-gal进行切割，菌落呈白色，即在筛选平板上含有重组质粒的菌落呈白色。 2．DNA复制的引物使DNA聚合酶能够从引物的5′端开始连接脱氧核苷酸。 (　　) 提示：DNA复制的引物使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。 3．Ti质粒上的T-DNA可与植物受体细胞的染色体DNA整合在一起。 (　　) × √ 1．目的基因主要指编码蛋白质的基因。 (　　) 4．检测目的基因是否表达可用抗原—抗体杂交技术。 (　　) √ √ 1．设计引物是PCR技术成功的关键步骤之一。下图为某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)，请判断是否合理并说明理由。 (1)第1组：_____ _____。 (2)第2组：_____。 提示：(1)不合理，引物Ⅰ和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效　(2)不合理，引物Ⅰ′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效 2．URA3基因位于酵母菌5号染色体上，编码 ... ...