2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课件(共26张PPT) -2025-2026学年人教版（2019）高中生物学选择性必修3

(课件网) 新课程标准 核心素养 1.举例说出动物细胞融合的概念、原理及应用。 2.阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程。 3.认同单克隆抗体在临床上有重要的应用价值。 1.生命观念———以细胞的结构与功能为基础，理解动物细胞融合的内涵；并正确理解植物体细胞杂交与动物体细胞融合技术的区别。 2.科学思维———结合具体实例，以流程图的形式表示单克隆抗体的制备过程。 第2节 动物细胞工程 二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 一、动物细胞融合技术 1、概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 4、结果： 形成杂交细胞。即融合后形成的原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。 2、原理： 细胞膜的流动性 3、诱导方式 物理法：电融合法 化学法：聚乙二醇（PEG)融合法 生物法：灭活病毒诱导法 5．意义： 细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。 6．应用 (1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。 (2)用于制造单克隆抗体。 植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志主要用途意义细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合获得完整的杂种植株主要用于制造单克隆抗体打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能7、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较二、单克隆抗体的制备 1.传统抗体制备方法及缺陷 向动物体内反复注射某种抗原 从动物血清中分离所需抗体 产量低、纯度低、特异性差 （2）缺点： （1）方法： 如何解决这个问题呢？ 能大量增殖，但不能产生抗体。 由于发明了单克隆抗体的制备技术，米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖 大胆设想： B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 （能产生抗体） （能大量增殖） 融合细胞 （既能产生抗体，又能大量增殖） 米尔斯坦 科勒 2.单克隆抗体制备原理： ①B淋巴细胞特点： 一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，B淋巴细胞在体外不能无限增殖。 ②骨髓瘤细胞特点： ③杂交瘤细胞特点： B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞，既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。 (2)制备过程 用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。 注射特定的抗原 培养骨髓瘤细胞 多种B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 诱导融合 将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合 多种杂交细胞 用特定的选择培养基进行筛选:在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。 对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞(分泌的抗体能与特定抗原结合) 杂交瘤细胞(既能迅速大量增殖，又能产生抗体) 从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 单克隆抗体 (2)制备过程 注射到小鼠腹腔内 体外培养 将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。 多种杂交细胞 【思考讨论】 1．给小鼠注射特定抗原的目的是什么？ _____。 2.为什么不直接选用特定的浆细胞直接去培养？ _____。 3.相应的B细胞是从小鼠的 内提取，骨髓瘤细胞是从小鼠的 中提取。 4．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经诱导融合后，培养基中共出现几种细胞？其中融合的细胞有几种？(如融合的话，只考虑两两 ... ...