专题七 生物技术实践 1.(2017·河南平顶山二模)常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌,操作如下: (1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后,要将平板倒置,其主要原因是 。? 获得纯净培养物的关键是 。? (2)在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是 。? 划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落,造成划线无菌落可能的操作失误是? 。? (3)将自然界中采集到的葡萄带回实验室,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以木糖为唯一 的固体培养基上,在适宜的条件下培养一段时间,获得能利用木糖的多个酵母菌菌落。? (4)若要检测土样中的酵母菌含量,应采用 法。在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间,这样做的目的是 。? 解析:(1)为了防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染,制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后,要将平板倒置;获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵。 (2)造成划线无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始。 (3)将自然界中采集到的葡萄带回实验室,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以木糖为唯一碳源的固体培养基上。 (4)若要检测土样中的酵母菌含量,应采用稀释涂布平板法;在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间,用于检测培养基平板灭菌是否合格。 答案:(1)防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染 防止外来杂菌入侵 (2)将聚集的菌种逐步减少以获得单个菌落 接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始 (3)碳源 (4)稀释涂布平板 检测培养基平板灭菌是否合格 2.(2017·青海西宁二模)如图是从土壤中筛选分解尿素细菌的过程,请回答下列问题: (1)图中选择培养基应以 为唯一氮源;鉴别培养基还需添加 作指示剂。? (2)土壤中的细菌之所以能将尿素分解,是因为细菌能合成 。? (3)制备实验所需的培养基时,在各成分都溶化后和分装前,要进行的是 和灭菌,对培养基进行灭菌的常用方法是 。? (4)在5个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为191、16、326、173和182。该过程采取的接种方法是 ,每克土壤样品中的细菌数量为 个。? 解析:(1)(2)配制以尿素为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌;分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌,若指示剂变红,可确定该种细菌能够分解尿素。 (3)制备实验所需的培养基时,在各成分都溶化后和分装前,要进行的是调整pH和灭菌,培养基用高压蒸汽进行灭菌。 (4)用于计数细菌菌落数的常用方法是稀释涂布平板法,统计的菌落数应介于30～300之间,故选择细菌菌落数为191、173和182的平板计数;每克该土壤样品中的菌落数对应的应该是每毫升菌液中的细菌数目,所以每克该土壤样品中的菌落数为[(191+173+182)/3]÷ 0.1×105=1.82×108。 答案:(1)尿素 酚红 (2)脲酶 (3)调整pH 高压蒸汽灭菌 (4)稀释涂布平板法 1.82×108 3.(2017·河南安阳一模)下图表示研究者从土壤中筛选分解尿素的细菌并计数的相关实验,请据图回答下列问题: (1)进行过程①和②的目的分别是 和 ... ...
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