课件34张PPT。第六章 第二节 基因工程及其应用教学重点 1、基因工程的基本原理 2、基因工程安全性 教学难点 1、基因工程的基本原理 2、转基因生物和转基因食品安全性。 基因工程又叫做基因_____技术或_____技术。按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以_____，然后放到另一种生物的细胞里，_____地改造生物的遗传性状。 拼接DNA重组修饰改造定向操作水平：操作环境：结 果： 地改造生物的性状， 获得人类所需要的品种。原 理：一、基因工程基因重组DNA分子水平生物体外定向培育转基因大肠杆菌的简要过程：普通大肠杆菌 (不能分泌胰岛素)思考： 转基因大肠杆菌的关键步骤有哪些？实例培育转基因大肠杆菌的关键步骤： 一种限制酶只能识别___种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子的酶。 1、基因的“剪刀”限制性内切酶1一）、基因工程工具如:EcoRI 只能识别GAATTC的序列，黏性末端思考： 限制酶作用特点及DNA连接酶作用部位什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 两种来源不同的DNA用_____限制酶切割后，末端可以互相黏合，这种黏合只能使互补的碱基连接起来，而DNA骨架上的缺口，需要靠DNA连接酶“缝合” 。 2、基因的“针线”———DNA连接酶同种思考： 1、 DNA连接酶作用部位？使用DNA连接酶制作重组DNA分子甲片段重组DNA分子DNA连接酶的作用是：A.子链和母链之间形成氢键 B.黏性末端之间形成氢键 C.两个DNA末端间的缝隙连接 D.A、B、C都对 C3、基因的运输工具———目前常用的运载体有_____。运载体质粒、噬菌体、动植物病毒自主复制环状质粒是存在于细菌细胞质中，能____ ___的很小的___ _的DNA分子。运载体特点 1能够在宿主细胞内复制并稳定保存； ２具有多个限制酶切点以便与外源基因相连； ３具有标记基因，便于进行筛选． 4、都有侵染或进入宿主细胞的能力大肠杆菌的质粒： 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内进行。1.以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、DNA连接酶使黏性末段的碱基之间形成氢键C及时训练2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNAD1、_____目的基因 2、目的基因与运载体_____ 3、将目的基因_____受体细胞 4、目的基因的_____表达与检测导入结合提取二）、基因工程操作步骤提供质粒细菌供体细胞同种限制酶DNA 连接酶 重组DNA （重组质粒）目的基因的提取、与运载体的结合思考： 1、目的基因与运载体能结合的原因目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达导入增殖目的基因产物繁殖速度快思考： 2、目的基因能在受体细胞中表达的原因 将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落，保留有表达产物的进一步培养、研究。 标记基因是否表达检测：表达：目的基因是否表达 大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。实例⒈要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是（ ） ①限制酶 ②连接酶 ③解旋酶 ④还原酶 Ａ．①② Ｂ．③④ Ｃ．①④ Ｄ．②③Ａ及时训练2、基因工程的正确操作步骤是（ ） ①使目的基因与运载体结合 ②将目的基因导入受体细胞 ③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求 ④提取目的基因 Ａ． ③② ④ ... ...
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