高考生物一轮复习学案第47讲植物组织培养技术及DNA和蛋白质技术

第47讲 植物组织培养技术及DNA和蛋白质技术（原卷版） 本模块主要包括DNA的粗提取与鉴定以及蛋白质的提取和分离，通过本模块，了解DNA的粗提取的原理、操作流程，蛋白质提取和分离的原理、方法及操作流程等 。考纲对本模块内容的具体要求如下： 1.实验:DNA的粗提取与鉴定（实验与探究能力） 2.蛋白质的提取和分离(理解应用水平) 本部分内容在在复习时，要学会分析DNA的提取与鉴定的方法，可以结合DNA的结构和功能综合考查。分析蛋白质的提取和分离方法，可以结合蛋白质的理化性质综合考查。 一、　DNA的粗提取与鉴定 1.基本原理 (1)DNA的粗提取:利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 (2)DNA与蛋白质在物理、化学性质方面的差异 比较项目 DNA 蛋白质 2 mol/L NaCl溶液中 溶解 析出 0.14 mol/L NaCl溶液中 酒精溶液中 溶解 蛋白酶 无影响 高温 ℃以 上变性 不能忍受 ℃的 高温 (3)DNA的鉴定:DNA+ 蓝色。 2.操作流程 材料的选取:选用DNA含量相对较高的生物组织 　　　↓ 破碎细胞(以鸡血为例):鸡血细胞→加 →用玻璃棒搅拌→用纱布过滤→收集滤液 　　　↓ 去除杂质:利用DNA在 中溶解度不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质 　　　↓ DNA的析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为95%的 溶液 　　　↓ DNA的鉴定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂,混合均匀后,将试管在沸水中加热5 min,溶液变成 3.明确实验中三种重复操作的目的和作用 (1)加2次蒸馏水 ①加到鸡血细胞液中,使 。 ②加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中,使NaCl溶液的物质的量浓度下降到0.14 mol/L,使DNA析出。 (2)用纱布过滤3次 ①过滤血细胞破裂液,得到 。 ②滤取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物)。 ③过滤溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液。 (3)用NaCl溶液4次 ①用2 mol/L的NaCl溶液,过滤除去 。 ②用0.14 mol/L的NaCl溶液,析出DNA。 ③用2 mol/L的NaCl溶液,溶解滤取的 黏稠物。 ④用2 mol/L的NaCl溶液,溶解丝状物用于DNA的鉴定。 二、　蛋白质的提取和分离 1.方法及原理 方法 原理 凝胶色谱法 根据 分离蛋白质 电泳法 各种分子 的差异以及分子本身大小、形状的不同 2.实验操作程序 样品处理:红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红 蛋白溶液 ↓ 粗分离:用透析法除去样品中相对分子质量较小的杂质 ↓ 纯化:用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化 ↓ 纯度鉴定:用 法来测定蛋白质的相对分子质量,即对血红蛋白进行纯度鉴定 判断下列说法的对错： 1.用菜花替代鸡血作为实验材料进行“DNA的粗提取与鉴定”实验，其实验操作步骤相同(　 　) 2.利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色(　 　) 一、DNA的粗提取与鉴定 例1：如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中的有关操作示意图，据图回答下列问题： (1)正确的操作顺序是_____。? (2)图中C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是_____和_____。? (3)图中A步骤中所用酒精必须经过_____才能使用，该步骤的目的是_____。? (4)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加_____试剂，沸水浴，如果出现_____，则该丝状物的主要成分为DNA。? 【答案】(1)C→B→E→D→A (2)加速鸡血细胞的破裂　降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出 (3)充分冷却　提取含杂质少的DNA (4)二苯胺　蓝色 【解析】(1)DNA的粗提取步骤：向鸡血细胞液中加入蒸馏水，使细胞破裂；用单层纱布过滤，收集滤液；在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液物质的量浓度为2 mol/L，过滤除去不溶的杂质；向滤液中加入蒸馏水，使NaCl溶液物质的量浓度降至0.14 mol/L，析出DNA；用玻璃棒搅拌，DNA就缠绕在玻璃棒上；将DNA溶解到浓NaCl溶液中 ... ...