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课件网) 实验1：大肠杆菌的培养和分离 一、基础知识 （一）微生物： 1、特点： 结构简单，形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物。通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到。 2、包括： 3、大肠杆菌的常识： 单细胞藻类、原生动物 …… 酵母菌、霉菌 …… 细菌、放线菌、蓝藻 …… 1、大肠杆菌的外形： ——— 杆状菌 2、大肠杆菌的代谢类型： 根据细菌所利用的碳源的不同，可分为两大营养类型———自养菌和异养菌 ——— 异养兼性厌氧菌 3、大肠杆菌的革兰氏染色： ——— 革兰氏阴性菌 根据细菌细胞壁成分的不同，通过革兰氏染色可 分为阳性和阴性两类 根据细菌其生命活动过程中是否需要氧气，可分为———需氧菌、厌氧菌和兼性厌氧菌 一、基础知识 （二）培养基： 1、分类(按物理状态)： 区别：是否加琼脂 用途： 单个细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体———菌落 不同的细菌的菌落特征不同；菌落是鉴定菌种的重要依据。 供微生物等生长繁殖所需的人工配制的营养基质。 1、分类(按物理状态)： 一、基础知识 （二）培养基： 供微生物等生长繁殖所需的人工配制的营养基质。 (根据化学成分)： 区别：成分是否明确 用途： 1、分类(按物理状态)： (根据用途)： ：含有微生物生长所需各种营养， 用于微生物生长和增殖 ：添加或减少某种成分，从多种微 生物中分离出所需的微生物 ：加入某种指示剂或化学药品，鉴 定是否含有所要测定的微生物 一、基础知识 （二）培养基： 供微生物等生长繁殖所需的人工配制的营养基质。 (根据化学成分)： 一、基础知识 （二）培养基： 2、培养基的营养成分： 一般都要含有水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等营养物质；但各种培养基的具体配方不同。 不同培养基还需要满足不同微生物对pH 、氧气、渗透压等的要求。 细菌：中性偏碱 霉菌：中性偏酸 细菌需加入一定量NaCl来维持渗透压 细菌喜荤———要用蛋白胨和酵母提取物配制 霉菌喜素———常用无机物或添加蔗糖的豆芽汁配制 厌氧微生物需提供无氧条件 自养微生物：无机碳源 异养微生物：有机碳源 培 养 基 成 分 成分 主要作用 主要来源 碳源 作能源物质 无机碳(CO2 、 NaHCO3) 或有机碳(糖类) 氮源 合成含N类化合物 N2、NH3、铵、硝酸盐、尿素、牛肉膏、蛋白胨 无机盐 调节渗透压等 水 溶剂，生化反应的介质 生长因子 酶和核酸的组成成分 维生素、氨基酸、碱基 注意： 1、不同生物所需营养物质(即维持机体生命活动，保 证生长发育、生殖所需的外源物质)不同： 动物：包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、 维生素六类； 植物：包括矿质元素、水、二氧化碳三类； 微生物：包括水、无机盐、碳源、氮源及生长因 子五类。 2、微生物需要补充生长因子是由于缺乏合成这些物质 所需要的酶或合成能力有限。 一、基础知识 （三）无菌技术： 1、概念： 2、具体操作： 对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒； 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌； 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰旁进行； 操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 3、消毒与灭菌的区别： 泛指在培养微生物的操作中，所有防止外来杂菌污染的方法。 成功培养微生物的关键。 消毒与灭菌的区别 成分 消毒 灭菌 概念 使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。 使用强烈的理化因素，杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 常用 方法 煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min 巴氏消毒法：常用于牛奶的消毒（70-75 ℃下煮30min或 80 ℃下 ... ...
