复习回顾：植物细胞工程采用的技术手段有哪些？其理论基础是什么？ 植物细胞工程 所采用技术的理论基础 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 离体的动物细胞能否发育成一个动物个体？动物细胞全能性如何？ 动物细胞工程 动物细胞工程 通常采用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 单克隆抗体 是其他动物细胞工程技术的基础。 治疗一个大面积烧伤的病人，常常需要进行皮肤移植，而病人自体皮肤有限，怎么办呢？ 要想获得大量的自体健康皮肤，方法就是取少量的自体皮肤细胞，通过动物细胞培养技术来获取大量健康的皮肤细胞。 一、动物细胞培养 1、概念：动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖. 2、原理：细胞增殖 定义：是指从供体获取组织或细胞后的初次培养。 取出组织 剪碎 单个细胞 细胞悬浮液 ①原代培养 3、过程 原代培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 从年龄看，材料动物有何特点，为什么？ 一般为动物胚胎或幼龄动物的器官或组织。因为这些细胞生命力旺盛，分裂能力强 成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养。 加培养液 转入培养瓶内培养 （ 贴壁生长长成单层细胞， 有接触抑制现象） 胰蛋白酶处理 （分解弹性纤维） 强调一：细胞贴壁过程 ■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 ■培养瓶或培养皿壁要求： 表面光滑、无毒、易于帖附。 ■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为 细胞的接触抑制。 强调二：接触抑制 思考：细胞发生接触抑制后如何使细胞继续分裂增殖？ 定义： 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.（分瓶培养的过程） ②传代培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶处理 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培 养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 3、过程： （分装前） 剪碎 1、动物细胞工程技术的基础是（ ） A、动物细胞融合 B、胚胎移植 C、动物细胞培养 D、核移植 2、在生物工程中一般都要用到酶，下列酶中属于动物细胞工程最常用的工具酶的是 （ ） A．限制酶 B．DNA连接酶 C．果胶酶 D．胰蛋白酶 C D 反馈练习 3、在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是 （ ） A．使动物组织分散为单个细胞进行培养 B．去掉细胞壁成为原生质体 C．去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合 D．促进蛋白质水解为多肽 4、在进行动物细胞培养时，通常选用的培养材料是 （ ） A、衰老退化的动物组织细胞 B、成熟动物个体的体细胞 C、动物的受精卵细胞 D、动物胚胎或幼龄动物个体的细胞 A D 5、下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是 （ ） A、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白 B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散 C、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中 D、培养至50代后的传代细胞称为细胞株 B 4、动物细胞培养条件： 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 4、气体环境： 补充合成培养基中缺乏的物质 一、动物细胞培养 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 36.5 + 0.5度 ；PH为7.2-7.4。 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。） 有氧 O2 和 CO2（95%空气和5% CO2 ） O2作用：进行 呼吸，提供能量 CO2作用：维持培养液的PH值 想一想 动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物细胞培养基有何独特之处？ 主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等 ... ...
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