第2课时 微生物的培养技术及应用 课标 要求 1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提 2.阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术 3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物 4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法 5.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法 考点一微生物的基本培养技术(识记·应用类) 1.培养基的配制 (1)培养基的概念、用途和类型 ①概念:人们按照微生物对 的不同需求,配制出的供其 的营养基质。 ②用途:用以 微生物或积累其 。 ③种类: 划分 标准 培养基类型 配制特点 主要应用 物理 性质 培养基 加入凝固剂较多 菌种 培养基 加入凝固剂 菌种 培养基 加入凝固剂 工业生产,连续培养 化学 组成 培养基 由已知成分配制而成,培养基成分明确 菌种 培养基 由天然成分配制而成,培养基成分不明确 工业生产,降低成本 目的 用途 培养基 添加某种指示剂或化学药剂 菌种的 培养基 添加(或缺少)某种化学成分 菌种的 (2)培养基的营养组成 ①一般都含有 、 、 和无机盐。 ②还要满足微生物生长对 的需求,如: 种类 对培养基的需求 乳酸杆菌 添加 霉菌 一般将培养基调至 性 细菌 一般将培养基调至 性 厌氧微生物 提供 的条件 2.无菌技术 (1)目的:获得 。 (2)关键:防止 污染。 (3)消毒与灭菌的比较 项目 消毒 灭菌 条件 较为 的理化因素 的理化因素 结果 杀死物体表面或内部 微生物 杀死物体内外的 微生物 芽孢 和孢子 一般不能杀灭 能杀灭 适用 对象 实验操作的空间、操作者衣着和双手 微生物培养器皿、接种用具和培养基等 常用 方法 消毒法、 消毒法等 灭菌法、 灭菌法、 灭菌法等 3.微生物的纯培养 (1)概念辨析 (2)酵母菌纯培养的操作步骤 [注意]倒平板的操作细节 ①培养基要冷却到50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。温度过高会烫手,过低培养基又会凝固。 ②要使锥形瓶的瓶口通过酒精灯火焰。通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。 ③倒平板时,要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不要完全打开,以免杂菌污染培养基。 ④平板冷凝后,要将平板倒置。因为平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,平板倒置后,既可避免培养基表面的水分过快地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基。 (3)平板划线法 ①平板划线法的操作步骤 ②平板划线时每次灼烧的目的 项目 目的 第一次划线前灼烧 杀死接种环上原有的微生物 中间每次划线前灼烧 杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端,使每次划线后菌种数目减少 划线结束后灼烧 杀死接种环上残存的菌种,避免微生物污染环境和感染操作者 考点易错·明辨析 (1)微生物在液体培养基中生长可形成菌落。() (2)获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染。() (3)配制培养基时应先灭菌再调pH。() (4)牛肉膏蛋白胨培养基中,牛肉膏为碳源,蛋白胨为氮源。() (5)[2023·河北卷]平板倒置培养为筛选乳酸菌创造无氧环境。() (6)煮沸消毒法中100℃煮沸5~6min可以杀死全部微生物的细胞和芽孢、孢子。() (7)[2022·湖北卷]为防止蛋白质变性,不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌。() 长句拓展·练思维 1.某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成了一片,可能的原因是 。 2.平板划线时最后一次划线不能与第一次划线相连的原因是 。 3.未接种的培养基直接培养起的作用是 。 命题角度一考查无菌技术及培养基 1.[2024·广东广州模拟]固氮微生物可将空气中的氮气(N2)还原为氨,并转化为细胞中的含氮物质,是土壤中氮素的主要来源。表格是一个用于分离培养固氮微生物的培养基配方,其中甘露醇的分子式为C6H14O6,下列叙述中错 ... ...
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