第38讲 微生物的培养与应用 [考纲明细] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.微生物在其他方面的应用 考点1 培养基及微生物的纯化培养技术 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 (2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。 (3)种类 ①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。 ②按照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基。 ③按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。 2．无菌技术 (1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 (2)关键：防止外来杂菌的入侵。 (3)不同对象的无菌操作方法(连线) 答案 ①、②、⑥—b———、Ⅱ ③、④、⑤—a———、Ⅳ 3．大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 ①操作步骤 ②倒平板的方法及注意事项 a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。 b．乙中的灭菌方法是灼烧灭菌。 c．丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。 (2)纯化大肠杆菌的两种方法 1)平板划线法 ①概念：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 ②注意事项： a. b．灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 c．第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 d．划线时最后一区不要与第一区相连。 e．划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 2)稀释涂布平板法 ①概念：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 ②操作过程 (3)菌种的保存方法 ①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。 ②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。 1．深挖教材 (1)倒平板操作为什么需要使锥形瓶的瓶口通火焰？ 提示 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 (2)平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 提示 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 2．判断正误 (1)氮源不可能作为细菌的能源物质(×) (2)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质(√) (3)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上(×) (4)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(√) (5)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落(×) (6)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落(√) 题组一 培养基及其制备方法分析 1．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是( ) A．操作的顺序为计算→称量→溶化→倒平板→灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．待培养基冷却到50 ℃左右时倒平板 D．待平板冷却凝固后将平板倒置 答案 A 解析 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，不能颠倒，A错误；牛肉膏比较黏稠，所以将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，待牛肉膏溶化并与称量纸分离后用玻璃棒取出称量纸，B正确； 待培养基冷却到50 ℃左右时倒平板，此时不烫手且为液体状态，C正确；平板冷却凝固后才能将平板倒置，D正确。 2．下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是( ) A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基 B．该 ... ...
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