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课件网) 样题细研 现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告并回答有关问题。 Ⅰ.实验原理： 。 根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。 Ⅱ.实验材料：活的小白鼠胚胎。 Ⅲ.药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片。 Ⅳ.实验步骤 （1）制备细胞悬浮液 把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶 中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细 胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。 （2）进行细胞培养 ①取A、B、C三个洁净的培养瓶， 。 ②向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入等 量的化学物质乙，并将培养瓶摇匀。 ③向C瓶内 。（3）制作临时装片 ①当细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取 出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从 瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细 胞并固定细胞。 ②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的 细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中 央, ，3～5 min后，盖上盖玻片。 （4）镜检和统计 把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜， 寻找处于 期的细胞，并与 对比以确 认发生变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该期 细胞总数的百分数（Q值）。 Ⅴ.结果与结论 经研究人员实验得知：A、B、C三个培养瓶的Q值依次 为：Q?A=1?3%、Q?B=12?5%、Q?C=0?1%，由此可 知该实验的结论是 。 Ⅵ.回答问题 在实验中，C培养瓶起什么作用？ 。 答案 Ⅰ.有毒物质能诱导细胞产生变 Ⅳ.（2）①消毒灭菌，加入等量的细胞悬浮液 ③加入等量生理盐水 （3）②用适宜浓度龙胆紫溶液染色 （4）细胞有丝分裂中 C组 Ⅴ.甲、乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲 Ⅵ.对照 规律总结 教材中有许多知识可以通过实验的方式进行考查：影响光合作用、呼吸作用的因素，各种激素生理功能，神经系统中反射弧的功能及兴奋在神经纤维上的传导，植物激素的发现及生理作用，微生物的培养及选择等。本节内容中应用动物细胞培养技术检测某物质的毒性就是这方面的典型例证。其实验原理为：应用动物细胞培养技术验证某物质的毒性。 利用含该物质的培养液培养动物细胞，一段时间后，取所培养的细胞制成装片观察，若发现标本中有发生染色体变异的细胞说明此物质有毒性，另外可根据染色体发生变异细胞占所有培养细胞的比例判断此物质毒性的大小。 变式训练 （2008年江苏，25）某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染，为查找污染原因设计了4个实验，实验条件除图示中的外其他均相同。下列各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是（多选） ( ) A.污染不是由于培养基灭菌时间短造成的 B.污染主要来源于组织培养所用的离体组织 C.调节培养基pH不能解决污染问题 D.调节培养温度不能解决污染问题 解析 由（1）、（3）、（4）曲线较为平缓可知，灭菌时间、pH、温度等对污染率影响不大；离体组织的灭菌时间与污染率呈反相关，影响较大。 答案 ABCD 返回 ... ...
