23.(12分)某真菌的W基因编码一种高效降解纤维素的酶，利用转基因技术可改造出生 产该酶的大肠杆菌工程菌，相关限制酶的识别序列如下表。请回答下列问题： 吸制酶 Xbal EcoRI Spel Xhol HindIII 识别序列 TICTAGA GLAATTC AICTAGT (5→3) CITCGAG ALAGCTT 终止子 空白对照 Spel EcoRI 23 45 戴基对(bp) 口 启动子 色氨酸合 成基因 3000 pBL(22kb)】 2500 HindIII 1500 750 500 引物2←一 3 a链 200 5b链 引物1 W基因 图1 图2 (1)利用PCR技术扩增W基因，需要引物、 ▲、4种脱氧核苷酸、含Mg2+的缓 冲液和耐高温的Taq酶，耐高温的Taq酶的适宜温度通常在▲℃左右。在制备 PCR反应体系时，每次用微量移液器吸取不同试剂前，需调整刻度和量程，并更换 经▲灭菌处理过的枪头。 (2)图1标识了载体pBL和W基因中限制酶的切割位点(1kb=1000bp,假设构建重组质 粒前后，质粒pBL对应部分大小基本不变)。己知a链为W基因转录模板链，结合 上表分析，为保证W基因与质粒pBL正确连接，PCR扩增W基因时需在引物1和 引物2的5端分别添加的碱基序列5-▲3、5▲3'。切割载体时应选 用的限制酶是▲(2分)。 (3)图1载体pBL中的色氨酸合成酶基因的作用是▲一，将重组质粒导入色氨酸合 成缺陷的大肠杆菌菌株，利用▲_的培养基筛选菌株并提取质粒，用引物1和引 物2进行PCR扩增，相关产物电泳图见图2。已知1号泳道和2号泳道分别是重组 质粒和空载质粒的电泳图（均用EcoI酶切成线性），在3号、4号的PCR扩增产物 中，符合预期的W基因的DNA片段是▲号，若要进一步验证可对其进行 ▲。空白对照组5中使用无菌水代替实验组的模板DNA,目的是▲。 生物学试卷第7页（共8页） 24.(11分)水稻的叶色（紫色、绿色）由两对等位基因(AWa、D/d)控制，籽粒颜色（紫 色、棕色和白色)也由两对等位基因控制。为研究水稻叶色和粒色的遗传规律，某团队 用纯合的水稻植株进行了杂交实验，结果如下表。请回答下列问题： 实验 亲本 F,表型 F,表型及比例 实验1 紫叶义绿叶 荣叶 紫叶：绿叶=9：7 实验2 紫粒X白粒 紫粒 紫粒：棕粒：白粒=9：3：4 (1)实验1中，F2紫叶水稻中纯合子的比例为▲一，实验2中，控制水稻粒色的两对 基因遵循孟德尔自由组合定律的原因是▲ (2)研究发现，基因D/d控制水稻叶色的同时，也控制水稻的粒色。已知基因型为BBdd 的水稻籽粒为白色，则实验2中棕粒水稻的基因型有▲。实验1中F2的紫叶 水稻的籽粒颜色类型有▲，基因型为Bbdd的水稻与基因型为▲一(2分) 的水稻杂交，子代籽粒的颜色可以出现3种。 (3)为探究AWa和Bb的位置关系，用基因型为AaBbDD的水稻植株M与纯合的绿叶棕 粒水稻杂交，若Aa和Bb位于非同源染色体上，则理论上子代植株的表型及比例为 ▲（2分)。 (4) 研究证实A和b、a和B均分别在同一条染色体上，若植株M自交，不考虑互换与 突变，理论上子代中紫叶棕粒植株所占比例为▲一(2分)，若用红色和黄色荧 光分子分别标记植株M细胞中的A、B基因，则在一个处于减数分裂Ⅱ的细胞中，最 多能观察到▲个荧光标记。 生物学试卷第8页（共8页） ... ...
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